13
5.4.3.3 Колбыспробами, подготовленнымипо 5.4.3.1, 5.4.3.2,закрываютватно-марлевымипробка-
ми, встряхиваютипомещаютвклиматостат.
П р и м е ч а н и е — Колбы с водорослями должны быть закрытыми для предотвращения снижения
испарения раствора; однако колбы не следует закрывать герметично, чтобы обеспечить воздухообмен, поэтому
рекомендуется применять ватно-марлевые пробки.
5.4.3.4 Тестирование (взависимостиотанализируемойпробы) проводятвтечение 72 чили 96 ч
(см.5.1) в климатостате при температуре (20 ± 2) °С и попеременном воздействии света и
темноты:
- 16 ч — приравномерномбеломосвещениивдиапазонеот 3000 до6000 лкнарасстоянии 0,35 м
отповерхностипробвколбах,
- 8 ч — при отсутствии освещения.
Содержимое каждой колбы при проведении тестирования перемешивают один — два разав
сутки.
П р и м е ч а н и е — Клетки водорослей необходимо поддерживать во взвешенном состоянии, путем
легкого встряхивания каждой колбы (например, вручную), чтобы обеспечить единый уровень рН и газовый
режим в различных слоях пробы.
5.4.3.5Черезкаждые 24 чтестированияопределяютплотность(численность)клетокводорослейв
каждойколбе (включаяконтрольную) однимизметодов, приведенныхвприложенииДВ.
5.4.3.6 Послеокончаниятестирования:
- измеряютрНвкаждойколбесанализируемойиконтрольнойпробами, приэтомзначениерНконт-
рольнойпробыпритестированиинедолжноменятьсяболеечемна ± 1,5 едрН;
- визуальноосматриваютвкаждойколбесостояниекультурыводорослей(побурение, посветление,
лизис и т. п.).
Любыеобнаруженныеотклонениярегистрируют.
5.4.4 Результаты тестирования считают достоверными, если соблюдаются следующие
условия:
a) плотность(численность)клетокводорослейвконтрольнойпробевконцетестированияувеличи-
лась не менее чем в три раза по сравнению с плотностью (численностью) клеток водорослей в начале
тестирования;
b) коэффициентколебанийтемповростаклетокводорослейвконтрольныхпробахвкаждойизтрех
колбтестируемойсериианализируемыхпробвтечениетестированиядолженбытьнеболее 5 % относи-
тельносреднеарифметическогозначенияплотности(численности)клетокводорослей;
c) уровеньрНвконтрольнойпробеизменилсянеболеечемна 1,5 едрНвконцетестирования;
d) токсичностьмодельноготоксикантанаходитсявпределах, указанныхв 5.3.5.4.
Еслиусловияперечислений a)—d)несоблюдаются,тонаходятпричины, устраняютихитестирова-
ниеповторяютсновойкультуройводорослей.
5.5 Обработка результатов
5.5.1 Порезультатамподсчетаплотности(численности)клетокводорослейпоДВ.1 (приложениеДВ)
для каждого заданного разбавления (концентрации) анализируемой пробы по трем колбам, в том числе
контрольным, рассчитывают среднеарифметическое значение плотности (численности) клетокводо-
рослей.
5.5.2 Определениетоксичностианализируемыхпроб
5.5.2.1 Токсическийэффектанализируемыхпробопределяютпоснижениюплотности (численно-
сти) клетокводорослейдлякаждогозаданногоразбавления (концентрации) анализируемойпробы, от-
носительноконтрольнойпробыА, %, после 72 ч (96 ч) тестированияирассчитываютпоформуле
х
A
=
x
к
−
х
ан
×
100,
(2)
к
где x
к
— среднеарифметическоезначениеплотности (численности) клетокводорослейвконтрольной
пробе, клеток/см
3
;
х
ан
— среднеарифметическое значение плотности (численности) клеток водорослей для
каждогозаданногоразбавления (концентрации) анализируемойпробы, клеток/см
3
.
ГОСТР 54496—2011