ГОСТ Р ИСО 11737-1-2000
Ь) погружение продукта в жидкую питательную среду с последующим культивированием и исследованием
роста. Если после погружения вжидкую питательнуюсреду и культивирования на части продуктов присутствуют
живые микроорганизмы, то результаты могут быть использованы для вычислении по методу НВЧ (А.4.2.6.7).
Если на всех образцах отмечается рост, метод НВЧ нельзя использовать, и метод валидации должен быть
пересмотрен.
В.2.1.4 Число колоний, подсчитанных после первичного применения методов удалении (В.2.1.2), выра
жают как часть общего числа подсчитываемых колоний.
П р и м е ч а н и е —Часть общего числа колоний может быть рассчитана ятя каждого продукта и
использована для определения эффективности отбора. В В.5.2.1.1 приведен рабочий пример.
В.2.2 Валидация с использованием инокулированного продукта
В.2.2.1 Используемый метод валидации должен быть определен и документирован перед началом
валидации процесса удалении микроорганизмов из продукта.
П р и м е ч а н и с —Важно не менять методы в процессе ватидаттионных экспериментов. Поэтому может
оказаться необходимым провести предварительные эксперименты дли поиска и оптимизации метода, который
подлежит валидации.
В.2.2.2 Должна быть приготовлена суспензия микроорганизмов, используемая дтя инокуляции продукта,
и в ней должны быть подсчитаны жизнеспособные микроорганизмы.
П р и м е ч а н и е —Выбор микроорганизмов, используемых для ватидаиии путем инокуляции продук
та, рассматривается в А.5.2.1.2. Микроорганизмы, выбранные для инокуляции, доджны противостоять воздей
ствию процесса высушивания. Поэтому обычно используются споры аэробных бактерий. Считаются
подходящими по своим свойствам споры Bacillus subtilis var. niger; может быть пригодной водная суспензия
Bacillus subtilis var. niger. приготовленная в соответствии с ГОСТ Р ИСО 11138-2.
В.2.2.3 Должно быть приготовлено соответствующее разведение этой суспензии и определено количество
жизнеспособных микроорганизмов в этом разведении. Инокулят должен иметь ту же концентрацию, что и
естественная контаминация продукта. Для образцов с низкой биоиагрузкон может быть подходящим обьем
суспензии с концентрацией, позволяющей расположить на продукте 100 живых микроорганизмов.
П р и м е ч а н и е —Может оказаться необходимым проведение предварительных экспериментов (В.2.2.1).
В.2.2.4 Должно бызъ выбрано некоторое количество стерильных продуктов или их частей. Каждый
продукт и«окулируется определенным объемом суспензии микроорганизмов (В.2.2.3) и. если это допустимо
для конкретного продукта, подвергается сушке в условиях ламинарного потока воздуха.
П р и м е ч а н и е —Если образец был простертыйзовам оксидом этилена, то он должен быть полностью
проветрен, чтобы уменьшить влияние каких бы то ни было остатков оксида этилена. Все возможные эффекты
ингибирования, вызываемые выделениям»! веществ из продуктов, должны быть исследованы в предварительных
экспериментах (В.2.2.1 и В.4).
Суспензия должна быть распределена в продукте таким образом, чтобы часть продукта, из которой
наиболее трудно удалить микроорганизмы в естественном процессе, тоже была включена.
В.2.2.5 Установленные методы (В.2.2) используются для определения числа инокулированмых микроор
ганизмов. удаляемых из продукта.
В.2.2.6 Число улатяемых микроорганизмов выражается как часть числа микроорганизмов, инокулиро-
ванных в продукт. Такие части могут быть рассчитаны для каждого продукта (В.2.2.4) и использованы дтя
вычисления эффективности отбора. В разделе В.5 приведен конкретный пример.
П р и м е ч а н и е —Данные, отклоняющиеся от результатов валилашш регенерации процесса отбора,
использующей прямую инокуляцию, лоджны рассматриваться с осторожностью, так как этот метод может
неточно имитировать истинную бионагрузку.
В.З Опенка условий культивирования
Условия культивирования, г.с. питательная среда и условия инкубирования, выбранные для оттенки биона-
грузки, нс могут обеспечить обнаружении всех потенциальных конгаминаитов. Поэтому на практике неизбежно
занижение бионагрузки. Text нс менее решение об условиях культивирования должно быгь принято. Эти условия
следует определить при валидации метода оценки (7.2).
Рациональное определение условий культивирования базируется на знании процесса производства,
производственной среды и материалов и последующем сравнении микроорганизмов, подсчитанных при этих
условиях культивирования и альтернативных комбинациях питательной среды и условий инкубирования.
Если при этом подходе подучена низкая бионагрузка. го предложенные условия культивирования доджны
быть пересмотрены с целью оптимизаций количества подсчитанных микроорганизмов.
В.4 Проверка выделения веществ, противодействующих оценке бнонагрузки
Эта проверка имеет ислью изучение воздействия на потенциально чувствительные микроорганизмы
веществ, которые могут выделиться в суспензирующую жидкость. Здесь приведен пример подхода, который
может быть использован для оценки методов на соответствие 6.2 настоящего стандарта и А.4.2.6.1.
15