ГОСТ 1»ИСО 11737-1-2000
1
биопленках. Наличие биопленки может быть установлено при валидации методов выделения, если высокое
число микробиологических части и отмечено в повторном выделении (A.5.2.I.I).
Любая технология, применяемая при оценке бионагрузки, должна быть воспроизводимой. Следует
избегать условий, которые могут понизить жизнеспособность микрооорганизмов. таких как чрезмерная
кавитации, механические воздействия, повышение температуры или осмотический шок.
Некоторые методы легче поддаются контролю, чем другие. Изменения метода и средств контроля этих
изменений должны рассматриваться при выборе метода и выборе подходящей комбинации изменений.
Например, для данного метода может быть увеличено время или изменен принцип хеханичсското воздействия для
увеличения эффекта удаления организмов.
Некоторые методы могут дезагрегировать продукт мри контроле (например, дезинтеграция, растворение
и перемешивание). Присутствие дезагрегированного материала может затруднить подсчет количества микро
организмов и потребовать дополнительной обработки, например, для отделения дезагрегированного
материала от элюента. Полученные при этом данные должны быть представительными.
Образны дтя тестирования следует передавать в лабораторию как можноскорее. Если задержка передачи
образиов в лабораторию неизбежна, то необходимо выбрать условия хранения таким образом, чтобы предот
вратить потерю микроорганизмов или изменения их популяции. Должно быть указано максимальное время
хранения. Высушивание может быт ь причиной значительногоснижения числа микроорганизмов и должно быть
учтено при выборе условий и времени хранения.
А.4.2.4.2 Отмывание
Образец дли контроля и известный объем элюента помещают в стерильную емкость для отмывания. В
емкости работают двухлопастные мешалки, принуждая элюент проходить через образец и вокруг него. Метод
особенно эффективен для мягких, волокнистых и/или абсорбирующих материалов, но неприменим дтя любых
материалов, которые могут привести в негодность емкость, например, устройств, содержащих иглы и большие
предметы.
Должно быть указано время обработки.
Этот метод может давать суспензию с низкой концентрацией микроорганизмов, поскольку используется
относительно большое количество эдикта. Для последовательного подсчета могут потребоваться другие
методы, такие как фильтрация (А.4.2.6.2) или чашечный метод (А.4.2.6.3).
А.4.2.4.3 Использование ультразвука
Контролируемый образец погружают в элюент известного объема в соответствующем сосуде. Каждый
сосуд и его содержимое обрабатываются в ультразвуковой ванне, или в содержащийся в сосуде элюент
погружают ультразвуковой зонд.
Определяют номинальную частоту ультразвука, продолжительность обработки и позиции, в которых
образцы находятся в ультразвуковой ванне. Может потребоваться ограничение числа одновременно обрабаты
ваемых образиов. чтобы мощности ультразвука хватило для эффективной обработки.
Метод особенно подходит дтя твердых водонепроницаемых образиов и продуктов сложной формы. Он
может быть деструктивным дтя некоторых медицинских изделий, в особенности для содержащих электронные
компоненты, таких как имплантируемые кардиогенераторы.
Энергия ультразвука и продолжительность обработки нс должны быть велики настолько, чтобы вызвать
гибель микроорганизмов или перегрев элюента.
А.4.2.4.4 Шейкинг (перемешивание встряхиванием) со стеклянными бусами и без них
Контролируемый образец погружается в сосуд с элюентом известного объема и подвергается тряске на
механическом шейкере (возвратно-поступательного, кругового или осевого действия) для удаления микроор
ганизмов. Может использоваться ручной шейкер, но его эффективность зависит от оператора. Для увеличения
поверхностноготрения и коэффициента выделения в шейкер могут добавляться стеклянные бусыопределенного
размера. Размер стеклянных бус. время и частота действия шейкера нс должны вызывать перегрева и/или
возможного повреждения микроорганизмов.
Добавление стеклянных бус может увеличить площадь поверхности, к которой могут прилипать микро
организмы.
Должны быть указаны время и частота действия шенкинга.
А.4.2.4.5 Вихревое смешивание
Контролируемые образцы погружают в закрытый контейнер, содержащий известный объем элюента. на
который воздействует вращающаяся лопатка вихревого миксера с образованием вихрей.
Должны быть указаны используемый контейнер, время и скорость перемешивания. Образующиеся вихри
будут также зависеть от даатсния, создаваемого руками, которое может быть различным. Метод прост и скор
в обращении, но подходит только дтя образной с правильными поверхностями.
А. 4.2.4.6 Промывание сильным потоком
Элюент проходит через внутренние
ПОЛОСТИ
контролируемого образца.
Поток можег образовываться за счет гравитации либо с помощью насоса. Может использоваться другой
метод, когда продукт наполняют элюентом. затем сжимают и встряхивают.
8