ГОСТ 33692—2015
1.41 г хлорамика-Т или хлорамина-Б растворяют в 10 см3 дистиллированной воды, добавляют
10 см3 пропилового или изопропилового спирта и 80 см3 буферного раствора. Раствор готовят в день
использования.
77.3.5 Приготовление цветного реактива
10 г парадиметилбензальдегида растворяют в 35 см3 хлорной кислоты непрерывно перемешивая.
Полученный раствор смешивают с 65 см3 пропилового или изопропилового спирта. Раствор готовят в
день использования.
7.7.3.6 Приготовление основного раствора оксипролина массовой концентрации c(CsH9N03)= 1г/дмз
100 мг оксипролина растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см3 дистиллированной водой,
добавляют одну каплю раствора соляной кислоты, доводят дистиллированной водой до метки и пере
мешивают.
Раствор устойчив в течение 1 мес при температуре 4 °С.
7.7.3.7 Приготовление рабочего раствораоксипролина массовой концентрации c(C5H9N03)=0.01 мг/смз
1 см3 основного раствора растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см3 дистиллированной
водой, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Раствор готовят перед использова
нием.
7.7.3.8 Приготовление градуировочных растворов оксипролина
В мерные колбы вместимостью 100 см3 вносят 5. 10, 20. 30 см3 рабочего раствора оксипролина.
Доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают.
Полученные градуировочные растворы содержат 0.5. 1.0. 2,0 и 3.0 мкг/смз оксипролина соответ
ственно.
7.7.4 Построение градуировочного графика
В пробирки вносят по 4 см3 каждого градуировочного раствора оксипролина. добавляют 2 см3 реак
тива для окисления, выдерживают 20 мин при комнатной температуре. Затем добавляют 2 см3 цветного
реактива, перемешивают, закрывают пробирку алюминиевой фольгой и помещают на водяную баню с
температурой {60 ± 0.5) °С и выдерживают 15 мин. Одновременно готовят два контрольных раствора,
ис пользуя вместо гидролизата дистиллированную воду.
Пробирки охлаждают в течение 3 мин водой или льдом и не позднее чем через 30 мин измеряют
оптическую плотность раствора.
Измеряют оптическую плотность раствора при длине волны (558 ± 2) нм в стеклянной кювете от
носительно контрольного раствора, используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр со свето
фильтром.
Строят градуировочный график, откладывая измеренные значения оптической плотности на оси
абсцисс, а на оси ординат соответствующие концентрации разбавленных стандартных растворов окси
пролина и проводя прямую линию через отложенные точки и начало координат.
7.7.5 Проведение измерений
В коническую колбу вместимостью 250 см3 помещают 0.3—1,0 г пробы, взвешенной с точностью
до четвертого десятичного знака, и добавляют 100 см3 соляной кислоты молярной концентрации
c(HCI) = 6 моль/дмз.
Гидролиз проводят на песчаной бане, соединив коническую колбу с холодильником в течение 8 ч.
Полученный теплый гидролизат, фильтруют через бумажный фильтр, используя воронку в мерную
колбу вместимостью 250 см3, промывая коническую колбу и фильтр дистиллированной водой темпера
турой 60 ’С - 70 °С. Содержимое колбы охлаждают, доводят дистиллированной водой до метки и пере
мешивают.
0.5—1,0 см3 гидролизата (в зависимости от предполагаемого содержания оксипролина в пробе)
вносят в мерную колбу вместимостью 100 см3,добавляют 50—60 см3 дистиллированной воды и нейтра
лизуют раствором гидроокиси натрия до pH = 6,0 по индикаторной бумаге. Содержимое колбы доводят
до метки дистиллированной водой и перемешивают.
В пробирку вносят 4 смз раствора гидролизата добавляют 2 см3 реактива для окисления, переме
шивают и выдерживают при комнатной температуре 20 мин. Затем добавляют 2 см3 цветного реактива,
перемешивают, закрывают пробирку алюминиевой фольгой и помещают на водяную баню с температу
рой {60,0 ± 0.5) °С и выдерживают 15 мин. Одновременно готовят два контрольных раствора, используя
вместо гидролизата дистиллированную воду.
Пробирки охлаждают в течение 3 мин водой или льдом и не позднее чем через 30 мин измеряют
оптическую плотность раствора.
13