ГОСТ Р 56145—2014
Допускается использовать поверхностный метод посева с инокуляцией 1 см3 подготовленных
проб жидкого продукта или разведений продукта иной консистенции на поверхность подсушенных
агаризованных сред по 5.3.16.2-5.3.16.4, 5.3.16.6 в чашках Петри путем равномерного распределения
инокулята, выдерживания в течение 10 мин и последующего удаления невпитавшейся жидкости сте
рильной пипеткой.
Поверхностный метод посева не применяется к функциональным пищевым продуктам и функ
циональным пищевым ингредиентам, содержащим в своем составе аэробные по природе молочно
кислые микроорганизмы рода
Lactococcus
и вида
Streptococcus thermophilus.
7.5.4Подсчет колоний, отбор колоний для подтверждения принадлежности к дрожжам и плесе
ням. обработку и представление результатов проводят по ГОСТ 10444.12.
П р и м е ч а н и е — Следует учитывать, что согласно |5] из-за низкого содержания азотистых соедине
ний и низкого уровня pH в среде по 5.3.16.4 молочнокислые микроорганизмы, содержащиеся в составе функцио
нальных пищевых продуктов и функциональных пищевых ингредиентов на молочной основе, могут давать то
чечные пылевидные колонии, которые не подлежат учету.
7.6 Определение бактерий
Listeria monocytogenes
7.6.1 Анализ на наличие в пробиотических продуктах бактерий
Listeria monocytogenes
проводят
по ГОСТ 32031 со следующими дополнениями.
7.6.2 Подготовку проб к анализу проводят с учетом положений 5.1.5, 5.1.7, 5.1.8 и [6].
7.6.3 Проведение анализа
7.6.3.1 Размер пробы для анализа соответствует массе (г) или объему продукта (см3), в котором
нормируют отсутствие бактерий
Listeria monocytogenes
(1), [2].
7.6.3.2 Анализируемую пробу
X
(г или см3) вносят в селективную среду первичного обогащения,
исходя из соотношения продукта и среды 1:9 (масса к объему или объем к объему).
Посевы культивируют при температуре (30 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч.
П р и м е ч а н и я
1 Первичное селективное обогащение необходимо для восстановления поврежденных клеток листерий. а
также для ингибирования роста конкурентной микрофлоры пробиотических продуктов (живых пробиотических и
молочнокислых бактерий родов
Lactobacillusspp., Lactococcusspp., Streptococcusspp.).
2
В виду сходства биологических характеристик, питательных потребностей, олтимумов pH. температуры
для роста листерий и молочнокислых микроорганизмов (см. (7)). на этапах первичного и вторичного обогащения
листерий используют питательные среды с селективными добавками, к которым проявляют наибольшую чув
ствительность присутствующие всоставе продуктов пробиотические микроорганизмы.
3 При этом учитывают, что лактококки и стрептококки ингибируются в присутствии акрифлавина и налидик-
совой кислоты. Чувствительность к антимикробным агентам бактерий рода Lactobacillus зависит от штамма, но
большинство промышленно-значимых штаммов проявляет чувствительность к полимиксину (см. [8]).
7.6.4 Пересев культуральной жидкости из среды первичного обогащения в в среду вторичного
обогащения, инкубирование и последующий пересев на плотные дифференциально-диагностические
среды осуществляют по ГОСТ 32031.
7.6.5 Изучение выделенных на чашках колоний, подтверждение их принадлежности к
Listeria
monocytogenes
и обработку результатов проводят по ГОСТ 32031.
8 Требования, обеспечивающие безопасность
8.1 Требования безопасности
При выполнении работ необходимо соблюдать следующие требования:
- помещение лаборатории должно быть оборудовано общей приточно вытяжной вентиляцией в
соответствии с ГОСТ 12.4.021;
- содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установ
ленных ГОСТ 12.1.005;
- требования безопасности при работе в микробиологической лаборатории с микроорганизмами
III-IV групп патогенности (опасности) по [4].
Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности в соот
ветствии с ГОСТ 12.1.004 и быть оснащено средствами пожаротушения соответствии с ГОСТ
12.4.009.
23