ГОСТ Р 56145—2014
средственмо в жидкую селективную обогатительную питательную среду лаурил сульфат-бульон (см.
5.3.13.3) по ГОСТ 31708.
7.2.2.2 Асептически взвешивают определенное количество сухого продукта, подготовленного по
5.1.6. и помещают в колбы с забуференной пептонной водой по 5.3.8. предварительно нагретой в ин
кубаторе до температуры 37 °С, исходя из соотношения продукта и среды 1:9 (масса к объему или
объем к объему). Смесь тщательно перемешивают. Допускается доводить активную кислотность до
7,0 ед. pH непосредственно в смеси для предварительной инкубации при использовании стерильных
растворов гидроокиси натрия или соляной кислоты и проверяя pH индикаторной бумагой.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение 24 ч.
7.2.2.3 На следующий день из этих колб переносят 1,0 см3культуральной жидкости в пробирку с
9 см3жидкой селективной обогатительной средой лаурил-сульфат-бульон (см. 5.3.13.3), и инкубируют
при температуре (37 ± 1) ’С в течение 24-48 ч.
Через 24 ч посевы просматривают, при отсутствии признаков роста пробирки оставляют в тер
мостате еще на (24 ± 1) ч. При наличии признаков роста (газообразование, образование хлопьев, по
темнение) производят пересев в пробирки с 10 см3жидкой селективной среды EC-бульон по 5.3.13.4.
Посевы инкубируют при температуре 44 °С до 48 ч.
7.2.3 Подтверждение принадлежности микроорганизмов, выросших в жидких средах по 7.2.2.3, к
презумптивным
Е. coli
и оценка результатов посева — по ГОСТ 31708.
7.2.4 При необходимости подтверждение принадлежности обнаруженных лрезумптивных Е.
coli
и дифференциацию от других видов рода
Escherichia
осуществляют по ГОСТ 30726 (с учетом прило
жения А), подтверждение принадлежности к Е.
соН 0i57-~
по ГОСТ 32011 после пересева микроор
ганизмов. выросших в жидких средах, на поверхность среды Эндо. Левина (см. 5.3.13.5) по
ГОСТ 26670.
7.3 Определение сальмонелл проводят по ГОСТ 31659 со следующими дополнениями.
7.3.1 Предварительное обогащение в жидкой неселективной среде
Для посева используют те количества пробиотических продуктов, в которых регламентируется
отсутствие бактерий рода
Salmonella.
Пробу продукта, подготовленную по 5.1.5, асептично переносят в
колбу со средой для предварительного обогащения (забуференной пептонной водой) по 5.3.8., по
догретой до температуры (37 ± 1) вС. при соотношении продукта и среды 1:9 (масса к объему или
объем к объему).
Допускается доводить активную кислотность до 7,0 ед. pH непосредственно в смеси для пред
варительной инкубации при использовании стерильных растворов гидроокиси натрия или соляной
кислоты, проверяя pH индикаторной бумагой.
Например, при необходимости подтверждения отсутствия бактерий рода
Salmonella
в 25 г про
дукта. пробу размером 25 г инокулируют в 225 см3забуференной пептонной воды.
Для ингибирования присутствующих в продуктах жизнеспособных пробиотических микроорга
низмов и создания условий для обогащения сальмонелл непосредственно перед посевом в забуфе-
ренную пептонную воду добавляют вспомогательные компоненты, не препятствующие росту сальмо
нелл по ГОСТ ISO 27205.
При анализе проб, содержащих пробиотические микроорганизмы в количествах до 10® КОЕ/г
(см3), используют забуференную пептонную воду с ванкомицином (10 мг/дм3).
При анализе проб, содержащих пробиотические микроорганизмы в количествах выше 10s
КОЕ/г(см3), используют забуференную пептонную воду двойной концентрации (по ГОСТ 31659) с до
бавлением ванкомицина (10 мг/дм3), малахитового зеленого (40 мг/дм3) и молока (10 г/дм3).
П р и м е ч а н и е — Добавление молока для уменьшения токсических свойств малахитового зеленого
на бактерии рода
Salmonella
необходимо только для проб пробиотических продуктов и БАД к пище, не содержа
щих молоха.
Допускается использовать более высокий коэффициент разбавления, в случае необходимости,
чтобы уровень пробиотических микроорганизмов в среде для предварительного обогащения непо
средственно после добавления пробы к среде не превысил 10’ КОЕ/r (см3).
Посевы инкубируют в течение (18 ± 2) ч при температуре (36 ± 1) °С.
7.3.2 Обогащение в жидкой селективной среде
Из посевов с предварительным обогащением по окончании инкубации делают пересевы парал
лельно в две жидкие среды для селективного обогащения: магниевую среду Раппапорта-
Вассилиадиса (RVS-бульои) по 5.3.14.1 и одну из двух сред — селенитовую по 5.3.14.2 или бульон
20