ГОСТ Р 56145—2014
Допускается использование одноразовой стерильной пластиковой посуды при соблюдении сро
ков годности, указанных на упаковке.
5.3 Приготовление растворов реактивов и питательных сред
Для приготовления растворов и питательных сред используют дистиллированную воду или под
готовленную питьевую воду.
5.3.1 Стерильная дистиллированная вода
Дистиллированную воду разливают в колбы или пробирки в необходимых количествах и стери
лизуют в течение (20 ±1) мин при (121 ± 1) °С.
5.3.2 Приготовление раствора двууглекислого натрия для нейтрализации проб
В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 100 см3 помещают (10.0 ± 0,1) г двууглекислого
натрия, добавляют небольшое количество дистиллированной воды и тщательно перемешивают.
Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки. Полученный раствор разливают по IQ-20
см3в пробирки и стерилизуют при температуре (121 ±1)°С в течение (15 ± 1) мин.
5.3.3 Приготовление раствора соляной кислоты объемной долей 20 %
В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 1000 см3 наливают до половины дистиллирован
ную воду, потом осторожно добавляют 20 см3 концентрированной соляной кислоты плотностью
1,19 г/см3 по ГОСТ 3118. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки. При необходи
мости полученный раствор разводят, доводя до нужной концентрации по объему.
5.3.4 Приготовление изотонического раствора хлористого натрия
В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 1000 см3помещают (8.5 ± 0,1) г хлористого натрия.
Добавляют дистиллированную воду и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистилли
рованной водой до метки. Полученный раствор разливают по 10 см3 в пробирки, по 90 см3 в колбы
соответствующей вместимости и стерилизуют при температуре (121
±
1) °С в течение (20 ± 1) мин.
5.3.5 Приготовление концентрированного раствора фосфатного буфера
В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 1000 см3 наливают 500 см3дистиллированной во
ды. добавляют (34,0 ± 0.1) г однозамещенного фосфорнокислого калия (КН2Р04) и тщательно пере
мешивают. Устанавливают активную кислотность раствора (7.2 ± 0.1) ед. pH добавлением раствора
гидроокиси натрия и доводят дистиллированной водой до метки.
Стерилизуют раствор при температуре (121 ± 1) °С в течение (20 ± 1) мин.
5.3.6 Приготовление разбавленного раствора фосфатного буфера
В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 1000 см3 помещают 1.25
cmj
концентрированного
раствора фосфатного буфера, добавляют дистиллированную воду и тщательно перемешивают. Объ ем
раствора доводят дистиллированной водой до метки. Полученный раствор разливают по 10 см3в
пробирки, по 90 см 5в колбы соответствующей вместимости, стерилизуют при температуре (121 ± 1)®С в
течение (20 ± 1) мин и используют для приготовления разведений.
5.3.7 Приготовление раствора лимоннокислого натрия
Растворяют (20,0 ± 0,1) г трехзамещенного лимоннокислого натрия в 1 дм3 дистиллированной
воды, разливают в пробирки по 10 см3 или в колбы по 90 см3и стерилизуют при температуре (121 ± 2) =С
в течение (15 ± 1) мин. Раствор используют для разведения функциональных продуктов на основе
творога, творожных продуктов, сыра.
5.3.8 Приготовление забуферонной пептонной воды
Забуференную пептонную воду для предварительного неселективного обогащения бактерий
рода
Salmonella,
коагулазоположительных стафилококков готовят согласно ГОСТ 31659. Разливают в
необходимом количестве в пробирки, флаконы или колбы соответствующей вместимости для обес
печения соотношения засеваемого продукта и среды 1:9. например, при посеве 25 г продукта — по
225 см3, 2 г продукта — 18 см3.
5.3.9 Приготовление растворов и реактивов для окраски по Граму осуществляют по ГОСТ
10444.1.
5.3.10 Для удаления закрепленных основных красящих растворов используют этиловый спирт
(при окраске спиртовым раствором кристаллического фиолетового) и ацетон (при окраске водным
раствором кристаллического фиолетового).
5.3.11 Приготовление питательных сред
Среды сухие промышленного изготовления, в том числе общего назначения, предназначенные
для культивирования бактерий с целью изучения их свойств (питательный агар или бульон, триптон-
соовый агар или бульон, мясо-пептонный агар или бульон, триптозный ГРМ-агар или бульон) готовят
10