ГОСТ Р 56145—2014
согласно прописям, указанным на этикетках. Допускается применение сред лабораторного приготов
ления из отдельных компонентов. Проверку качества подготовки, изготовления и оценки эффектив
ности питательных сред для выращивания бактерий осуществляют по ГОСТ ISO 7218. ГОСТ ISO
11133-1 и ГОСТ ISO 11133-2.
5.3.12 Определение pH питательных срод
Ориентировочное определение pH питательных сред допускается проводить с помощью инди
каторных бумажных полосок для определения величины pH. Определение активной кислотности (pH)
питательных сред проводят в использованием pH-метра по прилагаемым инструкциям к соответству
ющим приборам.
Устанавливают pH так. чтобы после стерилизации он составлял требуемую величину при тем
пературе 25 5С. При необходимости корректируют pH питательной среды, устанавливая ее в неболь
шом объеме путем добавления по каплям растворов гидроокиси натрия или соляной кислоты. Допус
кается для подкисления сред использовать 20 %-ный раствор молочной кислоты.
Исходя из количества раствора, пошедшего на установление pH в данном объеме, вычисляют,
какой объем раствора следует прибавить ко всему объему среды для достижения требуемой величи ны
pH. После прибавления раствора и тщательного перемешивания снова проверяют pH среды.
5.3.13 Питательные среды и растворы реактивов для выявления бактерий группы
кишечных палочек и
Escherichia coli
5.3.13.1 Среда Кесслер (с лактозой)
Жидкую селективную обогатительную среду Кесслер готовят по ГОСТ 31747. Дополнительно в
случае использования среды нормальной концентрации для посева образцов пробиотических про
дуктов на молочной основе, масса (объем) которых превышает 1 г (см3), разливают среду в колбы или
флаконы соответствующей вместимости, содержащие пробирки Дархама (поплавки), по 50 см3; в слу
чае использования среды двойной концентрации для посева образцов других пробиотических продук
тов. масса (объем) которых превышает 10 г(см3), разливают среду в колбы или флаконы соответ
ствующей вместимости, содержащие пробирки Дархама (поплавки), по 100 см3.
5.3.13.2 Бульон лактозиый с бриллиантовым зеленым и желчью
Жидкую селективную обогатительную среду бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и
желчью готовят по ГОСТ 31747. Дополнительно в случае использования среды двойной концентра ции
для посева образцов, масса (объем) которых превышает 10 г(см3). допускается разливать среду в колбы
или флаконы соответствующей вместимости, содержащие пробирки Дархама (поплавки), по 100 см3.
5.3.13.3 Бульон селективный с лаурилсульфатом (натрия додецилсульфатом)
К 1.0 дм3 водопроводной воды добавляют 20 г триптоэы (ферментативного перевара казеина и
животных белков), 5 г лактозы, по 2,75 г калия гидрофосфата и дигидрофосфата. 5 г хлористого
натрия. 0,1 г натрия додецилсульфата (лаурил сульфата), растворяют, нагревая на водяной бане при
помешивании 2-3 мин. При необходимости фильтруют через ватно-марлевый фильтр, после чего до
водят объем водой до 1 дм3. Устанавливают pH (6.8 ± 0,2) ед. при 25 °С. При необходимости приго
товления среды двойной концентрации количество всех ингредиентов, кроме воды, удваивают. Раз
ливают по 10 см3 в пробирки размером 16 х 160 мм. содержащие пробирки Дархама (в случае ис
пользования среды нормальной концентрации), или в пробирки размером 20 х 200 мм или колбочки
вместимостью 50 см3, содержащие пробирки Дархама (поплавки) (в случае использования среды
двойной концентрации).
Стерилизуют среду в автоклаве при температуре (121
±
1) °С в течение 10 мин. Пробирки Дар
хама не должны содержать воздушные пузырьки после стерилизации.
5.3.13.4 Сухие среды бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и желчью, среду Кесслер,
бульон селективный с лаурилсульфататом. ЕС-бульон промышленного производства подготавливают
для посева согласно прописи на этикетке.
5.3.13.5 Среды сухие Левина. Эндо’
Среды Левина (эозин-метиленовоголубой агар). Эндо промышленного вы
пуска готовят согласно прописи, указанной на этикетке банок. Изготовленные и разлитые в сте
рильные чашки Петри среды можно хранить при температуре (4 ± 2) °С до 10 сут.
Среды могут использоваться также для пересева бактерий рода
Salmonella.
11