ГОСТ Р 56145—2014
5.3.17 Питательные среды и растворы реактивов для выявления
L. monocytogenes
5.3.17.1 Бульоны Фрейзера для первичного селективного обогащения (полуконцентрированный)
и вторичного селективного обогащения (с полной концентрацией селективных компонентов) листерий
готовят в соответствии с ГОСТ 32031.
Готовые среды разливают в стерильные колбы: полуконцентрированный бульон Фрейзера — в
объемах, в 9 раз превышающих массу (объем) засеваемого продукта; бульон Фрейзера с полной кон
центрацией селективных компонентов — по 90 см3, и хранят в защищенных от света условиях при
температуре не выше 6 X не более трех недель.
5.3.17.2 Селективный накопительный бульон (UVM). питательный бульон для выделения и куль
тивирования листерий (ПБЛ I) для первичного селективного обогащения и селективный накопитель
ный бульон (UVM II). питательный бульон для выделения и культивирования листерий (ПБЛ II) для
вторичного селективного обогащения листерий готовят в соответствии с ГОСТ 32031.
5.3.17.3 Агар
Listeria
по Оттавиани и Агости (ALOA) — основную (первую) селективную диффе
ренциально-диагностическую плотную среду для выделения листерий готовят в соответствии с
ГОСТ 32031.
5.3.17.4 PALCAM-arap (полимиксин-акрифлавин-лития хлорид-цефтазидим-эсхулин-маннитол —
агар) — дополнительную (вторую) селективную дифференциально-диагностическую плотную среду
для выделения листерий готовят в соответствии с ГОСТ 32031.
Готовую среду разливают в стерильные чашки Петри и хранят в защищенных от света условиях
при температуре не выше 8 °С
5.3.17.5Оксфорд-агар—дополнительную(вторую)селективнуюдифференциально-
диагностическую плотную среду для выделения листерий готовят в соответствии с ГОСТ 32031.
При приготовлении среды допускается замена комплекса рекомендованных в 5.3.16.5 на лоли-
миксин В сульфат в количестве 500000 ME на 1 дм2среды.
Готовую среду разливают в стерильные чашки Петри и хранят в защищенных от света условиях
при температуре не выше 8 X .
5.3.17.6 Питательный агар для выделения листерий (ПАЛ) — дополнительную (вторую) селек
тивную дифференциально-диагностическую плотную среду для выделения листерий готовят в соот
ветствии с ГОСТ 32031.
5.3.17.7 Питательный агар с 1 % глюкозы (МПА с 1 % глюкозы) и питательный бульон с 1 % глю
козы (МПБ с 1 % глюкозы) — для изучения культурально-морфологических свойств листерий готовят
в соответствии с ГОСТ 10444.1. в том числе из сухих основ промышленного производства — по
5.3.11.
5.3.17.8 Трипкаэо-соевый бульон (TSB) и трипказо-соевый агар (TSA) — для изучения культу
рально-морфологических свойств листерий готовят в соответствии с ГОСТ 32031.
5.3.17.9 Триптон-соевый бульон с дрожжевым экстрактом (ТБУЕВ)/Триптон-соевый агар с дрож
жевым экстрактом (TSYEA) для изучения культурально-морфологических свойств листерий готовят в
соответствии с ГОСТ 32031.
5.3.17.10 Кровяной агар для определения гемолитических свойств листерий
К растопленному и охлажденному до 45-50 X питательному агару с 1% глюкозы (см. 5.3.17.8)
добавляют 5 % по объему дефибринированной крови барана (см. 5.3.15.8). Разливают в чашки Петри
диаметром 90 мм по 15 см4среды и подсушивают при 37 °С. Посев производят в теплые чашки.
5.3.17.11 Питательный агар с эритроцитами барана для определения 0-гемолитической актив
ности
Listeria monocytogenes
Дефибринированную или стабилизированную цитратом кровь барана центрифугируют в асепти
ческих условиях 30 мин при 900 об/мин. Надосадочную жидкость сливают. Осадок суспендируют в
стерильном изотоническом растворе хлористого натрия до первоначального объема, добавляют в
количестве 5 % по объему к растопленному и охлажденному до 45 °С — 50 °С питательному агару.
Разливают в чашки Петри по 10 см3, подсушивают при 37 X . Чашки используют для посева теплыми.
5.3.17.12 Среда для определения подвижности — среда для изучения физиолого-
биохимических свойств листерий
20 г гидролизата казеина ферментативного. 6 г пептона мясного ферментативного и 5 г агара
растворяют в 1000 см3дистиллированной воды, устанавливают pH так. чтобы при температуре 25 X
Среда может использоваться также для определения подвижности бактерий рода
Salmonella.
16