ГОСТ ISO 15163—2014
V — объем собранной фракции (V = 50см3),см3;
d — коэффициентразбавления или концентрациианализируемойфракции(например, d = 3. когда 1 см3
фракции был разбавлен 2 см3буфера для проведения испытания на свертываемость, и d = 0.25,
когда вместо 0.5 см3использовались2 см3для 25 см3молока прииспытании на свертываемость);
^ — время свертывания, полученноес разбавленным фермонтным препаратом (7.5), с;
t2 — время свертывания, полученное с обессоленным ферментным препаратом в том же разбавле
нии(7.5.2 или 7.5.3), с.
Для конкретного порошкового молока и конкретного ферментного препарата поправочный коэф
фициент fполучают путем построения графика времени свертывания относительно 1/р (см. пример). В
соответствии с формулой Хольтера / = /+ Ыс, где f — это экстраполированное значение tдля Ыс = 0.
Поставщикстандартного порошкового молока также даеткоэффициентf.
П р и м е р — Для определения константы /для фракции химозина готовят 100 см3 концентрированного рас
твора чистого химозина в буферном растворе 11(4.12.2). Этот препарат может быть получен из одного или несколь
ких разделений телячьего сычужного фермента (первая фракция) на хроматографе. Затем готовят не менее шести
разных разбавлений этого препарата буферным раствором II (4.12.2).
Определяют время свертывания разных разбавлений в соответствии с методом, установленным е
ISO 11815(IDF 157. Время свертывания следует равномерно распределить от 240 до 1200 с.
Значение р для наименьшего разбавления (время свертывания около 300 с) принимают за 1.00. а значения
для других разбавлений устанавливают в зависимости от этого, например. 0.50 (1/2). 0.33 (1/3). 0.25 (1/4). и т. д.
Строят график t - а (1/р) и вычисляют поправочный коэффициент г Если /-равен или больше 0.999. можно опреде лить
константу f\ если г меньше 0.999. делают новые разбавления и повторяют измерение времени свертывания.
Для определения константы /для фракции говяжьего пепсина готовят 100 см3концентрированного раствора
чистого говяжьего пепсина в буферном растворе III (4.12.3). Этот препарат может быть получен из одного или
нескольких разделений ферментного препарата из сычугов крупного рогатого скота (вторая фракция) на хроматог
рафе. Затем готовят не менее шести разных разбавлений этого препарата буферным раствором III (4.12.3).
Определяют время свертывания в тех же временных пределах, как указано для фракции химозина, и вычис
ляют г. Если гравно или больше 0.999. можно определить константу /.
8.3 Выражение результатов
Выражают результат испытанияс точностью до целых значащих цифр.
9 Прецизионность
9.1 Межлабораторные испытания
Значения параметров прецизионности получены по результатам межлабораторных испытаний
жидких ферментныхпрепаратов, проведенныхв 1995г. в соответствиис ISO57251>. Результаты межла
бораторныхиспытаний были статистически проанализированы вновьв марте 2009 г. всоответствиис[3] и
[4]. Полученные значения не могут быть применимы к диапазонам концентраций и матрицам, кроме
указанных.
Результаты исследования приводятся в приложении В.
П р и м е ч а н и я
1 Значения повторяемости и воспроизводимости выводят из значений среднеквадратических отклонений
s0. которые являются оценками истинного среднеквадратическогоотклонения метода. Каждоезначение повторяе
мости и воспроизводимости представляет максимальную разницу междудвумя результатами испытаний, ожидае
мых в 95 % случаев, при сравнении двух результатов. Если, в конечном итоге, значительно меньше, чем 95 %
случаев находятся в пределах значений, указанных ниже (9.2 и 9.3). то рекомендуется проанализировать
условия выполнения анализа.
2 Из-за некоторых различий растворяющей способности иопределенной степени неоднородности порошко
вого ферментного препарата, процентные значения параметров прецизионности, повторяемости и воспроизводи
мости могут быть несколько выше при анализе порошкового сычужного фермента.
9.2 Повторяемость
Среднеквадратичоскоеотклонение srикоэффициент вариации повторяемости Cv „ выражающие
изменчивость независимых аналитических результатов, полученных одним и тем же оператором, на
одном и том же оборудовании, в одних итех же условиях, на одной итой же пробедля анализа жидкого
ферментного препарата, в течение короткого промежутка времени, не более чем в 5 % случаев будет
больше, чем а) или Ь):
1> ISO 5725:1986. в настоящее время отменен и заменен (в частях) на (3) и [4).
8