ГОСТ Р 55298—2012
6.9.2Результаты определений, полученные в условиях воспроизводи-мости по ГОСТ Р ИСО
5725-1. признаются удовлетворительными, если выполняется условие приемлемости
d
X - среднеарифметическое значение двух окончательных результа
тов определений, полученных в условиях воспроизводимости,
ед. Экзо-ПгС/г (для порошкообразного препарата) или
ед. Экзо-ПгС/см3(для жидкого препарата);
CD .95 - критическая разность, равная 10 % при доверительной
вероятности Р = 0.95.
7Методопределенияпектинэстеразнойактивностиферментных
препаратов (ПэС)
7.1 Сущность метода
7.1.1 Метод основан нагидролизе высокометоксилированного пектина анализируемым
ферментным препаратом с последующим определением освободившихся в результате гидролиза
карбоксильных групп.
7.1.2 Пектинэстеразная активность (ПэС) характеризует способность ферментного препарата
катализировать гидролиз сложноэфирных связей в молекуле высокометоксилированного пектина с
образованием карбоновых кислот и метилового спирта.
7.1.3 За единицу пектинэстеразной активности принято такое количество фермента, которое
способно катализировать гидролиз 1.0 мкмоль сложноэфирных связей в молекуле пектина за 1 мин
при температуре 30 X и значении кислотности 4.0 ед. pH.
Пектинэстеразная активность выражается в ед.ПэС/r (для порошко-образного) или ед.ПэС/см3
(для жидкого) анализируемого ферментного препарата.
Сравнимые результаты при работе с различными субстратами можно получить только при
пересчете полученных данных на субстрат со 100 %-ной степенью метоксилирования.
7.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда и реактивы
7.2.1 Для определения пектинэстеразной активности применяют средства измерений,
аппаратуру, лабораторную посуду, материалы, реактивы, указанные в 4.2, со следующими
дополнениями:
7.2.1.1 Микробюретка вместимостью 1.0 см3по ГОСТ 29251.
7.2.1.2 Пектин свекловичный со степенью метоксилирования (этерификации) не менее 80 % и
массовой долей основного вещества не менее 70 % по ГОСТ 29186.
7.2.1.3 Кислота щавелевая по ГОСТ 22180.
7.2.1.4 Фенолфталеин по ГОСТ 5850.
7.2.1.5 Воронка Бюхнера по ГОСТ 9147.
7.2.1.6 Марля медицинская по ГОСТ 9412.
7.2.1.7 Стекло часовое диаметром 80 мм.
7.2.1.8 Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.
7.2.2 Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 2 (х. ч.) или 3 (ч. д. а.).
7.2.3 Допускается применение средств измерений, вспомогательного оборудования с
аналогичными метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов по качеству не
хуже вышеуказанных.
7.3 Подготовка к анализу
7.3.1 Приготовление раствора пектина массовой долей 1,0 % (субстрат)
Пектин, взятый с расчетом, чтобы100 см3 раствора содержало 1.00 г чистого пектина (в
соответствии с приложением А),всыпают тонкой струей при непрерывном перемешиваниив
стаканчик вместимостью 100 см3, куда предварительно наливают 70 см’ дистиллированной воды и
оставляют на 2 ч при температуре 20 X для набухания и растворения, после чего помещают на ночь в
холодильник.
(17)
где X , и Х 2- окончательные результаты определений, полученные в двух
лабораториях в точном соответствии с методом, в условиях
повторяемости, ед. Экзо-ПгС/г (для порошкообразного препа
рата) или ед. Экзо-ПгС/см3 (для жидкого препарата);
15