ГОСТ 31750—2012
б) Приготовление раствора ацетатного буфера концентрации 2,5 мг/см3
(0,8
±
0.1) г аминоуксусной кислоты переносят в мерную колбу вместимостью 2000 см3,добавляют
1800 см3дистиллированной воды, перемешивают. Затем ледяной уксусной кислотой доводят раствор
до pH 3,2 и добавляют дистиллированную воду в колбу до метки. Полученный раствор фильтруют
через фильтр с размерами пор 0,45 мкм. Приготовленный раствор ацетатного буфера хранят при
температу ре 4 °С в течение 1 мес.
в) Приготовление раствора сахарозы для разбавления образцов
(60,0
±
0.1) г сахарозы переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, прибавляют 50 см3рас
твора ацетатного буфера, приготовленного по 4.1.1.2 б), и перемешивают.
г) Приготовление раствора акриламида концентрации 60 мг/см3
(6.0
±
0,1) г акриламида переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, добавляют (0.30
±
0.01) г
N.N-метилбисакриламида и (0,020
±
0,001) г аскорбиновой кислоты, доливают в колбу раствор ацетат
ного буфера, приготовленного по 4.1.1.2 б), до метки и перемешивают. Приготовленный раствор акри
ламида хранят при температуре 4 °С в течение 1 мес.
д) Приготовление раствора инициатора
Раствор готовят непосредственно перед анализом. (0.10
±
0,01) г 7-водного сульфата железа (II)
переносят в мерную колбу вместимостью 10 см3и растворяют дистиллированной водой до метки.
е) Приготовление раствора катализатора
Раствор готовят непосредственно перед анализом. В мерную колбу вместимостью 10 см3 микро-
пипеткойсо съемным наконечником вносят 0,33 см3 пероксида водорода концентрации 30 об.% идово
дят объем до метки дистиллированной водой.
ж) Приготовление раствора трихлоруксусной кислоты концентрации 9.6 %
(96,0
±
0.1) г трихлоруксусной кислоты переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3и рас
творяют дистиллированной водой до метки.
и) Приготовление основного раствора кумасси бриллиантового синего G-250
(5.0
±
0,1) г кумасси бриллиантового синего переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3и
растворяют этиловым спиртом. Содержимое колбы перемешивают в течение 1 ч на смесителе, после
чего фильтруют через бумажный фильтр для удаления из раствора неорганических солей.
к) Приготовление окрашивающего раствора бриллиантового синего
Для приготовления окрашивающего раствора смешивают 5 см3 основного раствора кумасси брил
лиантового синего, приготовленного по 4.1.1.2 и), и 95 см3 раствора трихлоруксусной кислоты, приго
товленного по 4.1.1.2 ж).
л) Приготовление раствора метилового зеленого
(0,50
±
0.01) г метилового зеленого переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 и раство
ряют этиловым спиртом. Содержимое колбы перемешивают в течение 1ч. после чего фильтруют через
бумажный фильтр и разбавляют равным объемом раствора сахарозы, приготовленного по 4.1.1.2 в).
4.1.1.3 Подготовка лабораторной пробы макаронных изделий
Отбор и подготовка проб — по ГОСТ 14849 или нормативному документу, действующему на тер
ритории государства, принявшего стандарт со следующим дополнением.
Измельченную лабораторную пробу просеивают через лабораторное сито размером отверстий
500 мкм. отбирают пробу для анализа массой (0.20
±
0,01) г и переносят ее в микроцентрифужную про
бирку. добавляют 0.6 см3 растворадля экстракции, приготовленного по4.1.1.2 а). Содержимое пробирки
перемешивают в течение 10 с и оставляют на 1ч при температуре (20
±
5) °С. Раствор центрифугируют
в течение 5 мин и 0,2 см3 центрифугата переносят в микроцентрифужную пробирку, содержащую 0.4 см
раствора сахарозы, приготовленного по4.1.1.2 в). Пробирку закрывают и перемешивают в течение 10 с.
Приготовленный экстракт пробы хранят при температуре (4
±
2)°С не более 10 дней.
4.1.1.4 Подготовка гелей
Для приготовления геля в колбе Бунзена с боковым отводом вместимостью 250 см3 смешивают
30 г раствора акриламида, приготовленного по 4.1.1.2 г), и 0,075 см3раствора инициатора, приготовлен
ного по 4.1.1.2 д). Дегазируют раствор вакуумным насосом в течение 2 мин при постоянном перемеши
вании. Затем добавляют в колбу с гелем 0.12 см3раствора катализатора, приготовленного по 4.1.1.2 в),
осторожно вращая колбу вручную в течение 10 с. избегая образования воздушных пузырей.
4.1.1.5 Подготовка к проведению анализа
Собирают кассеты для геля с промежутками между дорожками 1.5 мм.
Осуществляют сборку камеры для электрофореза, заполняют ее раствором ацетатного буфера,
приготовленным по 4.1.1.2 б), закрывают защитной крышкой и подсоединяют электроды к источнику
4