ГОСТ ISO 11737-1— 2012
Приложение В
(справочное)
Руководство по валидации микробиологических методов оценки
В.1 Введение
В этом приложении приведены методы, которые могут быть использованы для валидации
методов оценки бионагрузки. Могут быть использованы иные подходы.
Для точного применения этих методов необходим соответствующим образом подготовленный и
квалифицированный персонал. Необходимо учитывать конфигурацию продукта и ситуации, в которых
среди микроорганизмов, составляющих бионагрузку, находятся некоторые контаминанты.
В.2 Валидация методов удаления микроорганизмов из продуктов
Примечание— В этом приложении содержатся два метода валидации процесса удаления
микроорганизмов из продукта, хоторые были введены в А.5.2; в В.2.1 приведен метод повторяющейся обработки
(А.5.2.1.1), в В.2.2— методинокулированногопродукта (А.5.2.1.2).
В.2.1 Валидация с использованием повторяющейся обработки
Примечание — При этом методе для валидации используют фактическую бионагрузку. Иногда этот
метод именуется «избыточной регенерацией».
В.2.1.1 Перед началом валидации процесса удаления микроорганизмов из продукта бионагрузка
должна быть определена и документирована.
Примечание— В процессе экспериментов принятый метод нельзя заменять другим. Поэтому
необходимо провести предварительные эксперименты для поиска и оптимизации метода, который подлежит
валидации.
В.2.1.2 Отбирается определенное количество продуктов или частей продуктов, для которых
нужно определить коэффициент регенерации. Каждый продукт должен быть испытан (В.2.1.1). Этот
метод используется для оценки числа микроорганизмов на продукте.
После определения микробной загрязненности продукта этот же метод может быть использован
несколько раз для того же продукта, чтобы определить эффективность отбора.
Примечание — Точное число повторений, которое гложет быть сделано, зависит от множества
факторов, включая природу продукта и микроорганизмов, составляющих бионагрузку, и исходного уровня
контаминации.Дляопределения числаповторений могут бытьпроведены предварительныеэксперименты.
В.2.1.3 Длянекоторыхпродуктовполезно выяснить,остались ли жизнеспособные
микроорганизмы на продукте после повторной обработки. Это можно сделать одним из следующих
способов:
a) покрытие поверхности продукта расплавленной питательной средой, которая после
затвердевания помещается в подходящие условия культивирования (А.4.2.4.9). Образовавшиеся
колонии подсчитываются;
b
) погружение продукта в жидкую питательную среду с последующим культивированием и
исследованием роста. Если после погружения в жидкую питательную среду и культивирования на
части продуктов присутствуют живые микроорганизмы, то результаты могут быть использованы для
вычисления по методу НВЧ (А.4.2.6.7). Если на всех образцах отмечается рост, метод НВЧ нельзя
использовать, и метод валидации должен быть пересмотрен.
В.2.1.4 Число колоний, подсчитанных после первичного применения методов удаления (В.2.1.2),
выражают как часть общего числа подсчитываемых колоний.
Примечание — Часть общего числа колоний может быть рассчитана для каждого продукта и
использована для определения эффективностиотбора. В В.5.2.1.1 приведен рабочий пример.
В.2.2 Валидация с использованием инокулированного продукта
В.2.2.1 Используемый метод валидации должен быть определен и документирован перед
началом валидации процесса удаления микроорганизмов из продукта.
Примечание — Важно не менять методы в процессе вапидационныхэкспериментов. Поэтому может
оказаться необходимым провести предварительные эксперименты для поиска и оптимизации метода, который
подлежит валидации.
В.2.2.2 Должна быть приготовлена суспензия микроорганизмов, используемая для инокуляции
продукта, и в ней должны быть подсчитаны жизнеспособные микроорганизмы.
15