ГОСТ ISO 11737-1— 2012
Для удаления микроорганизмов с твердых поверхностей с помощью жидкости в нее может
добавляться поверхностно-активное вещество.
Основные элюенты и разбавители приведены в таблице А.1.
Т а б л и ц аА . 1 — Примеры элюентов и разбавителей
Раствор
Концентрация в воде
Применение
0.25%
0.1—1.0%
Рингера
Пептон
Пептонный буфер
Общее
Общее
Общее
Фосфатный буфер
0.067 М фосфат
0,43 % хлористый натрий
0.1 % пептон
0,02 М фосфат
0.9 % хлористый натрий
Общее
Хлористый натрий
0,25—0.9 %
Общее
Кальгон Рингера
0.25 %
эастворение тампонов с алиги-
4атом кальция
Тиосульфат Рингера0.25 %Нейтрализация остатков хлора
Водаэастворениеводяныхпроб
фиготовление изотонических
хастворов растворимых
иатериалов до начала подсчета
Примечание — Этот перечень не является исчерпывающим. Детергент, такой как полисорбат (Твин 80)
может добавляться к элюенту и к разбавителю. Как правило, используют концентрацию от 0.01 до 0.1 %. е
зависимости от специфики применения. Соответствующую концентрацию детергента в каждом случае выбирают с
таким расчетом, чтобы избежать пенообразования.
А.4.2.6 Перенос в питательную среду
А.4.2.6.1 Общие положения
Процедура приготовления суспензии микроорганизмов должна предусматривать контроль
наличия живых микроорганизмов в элюенте. который должен проводиться одним из методов,
описанных в А.4.2.6.2—А.4.2.6.7.
Перед переносом в питательную среду может потребоваться дополнительная обработка, чтобы
дезагрегировать микроорганизмы и таким образом уменьшить разброс. В некоторых случаях метод,
используемый для выделения микроорганизмов из контролируемого образца, может разрушать
агрегаты. В некоторые моменты может быть необходимо проведение отдельной обработки.
Если в элюенте присутствуют бактерицидные или бактериостатические вещества, их
концентрация может быть снижена до значения, не оказывающего никакого влияния на
микроорганизмы при растворении, фильтрации или химической инактивации. Присутствие
бактерицидных или бактериостатических веществ может по этой причине оказать влияние на выбор
метода подсчета.
В методе подсчета колоний нужно принимать во внимание верхний предел колоний,
появляющихся при инкубировании. Он должен быть таким, чтобы каждый живой микроорганизм мог
быть выявлен как видимая колония, не испытывающая вредного влияния находящихся рядом
микроорганизмов. Присутствие волокон может препятствовать образованию дискретных колоний и.
следовательно, затруднять подсчет.
А.4.2.6.2 Мембранная фильтрация
Мембранная фильтрация и последующая инкубация фильтра на подходящей питательной
среде для получения видимых колоний является эффективным средством оценки контаминации.
Мембранные фильтры с соответствующими размерами пор способны удалять микроорганизмы из
элюента, проходящего через них. Фильтр с порами размером 0.45 мкм обычно используется для
улучшения условий образования колоний. Для инкубации мембранный фильтр может быть положен
либо на поверхность агара, либо на абсорбирующую прокладку, пропитанную питательной средой.
Образованные на поверхности мембранного фильтра колонии могут быть подсчитаны и изолированы
для их классификации.
Мембранная фильтрация особенно пригодна для суспензий с низкой концентрацией
микроорганизмов.
10