ГОСТ ISO 11737-1— 2012
поверхностью. Микроорганизмы в биопленках могут проявлять увеличенную резистентность к
процессу стерилизации. Образование биопленок обычно не происходит при производстве
медицинских изделий, хотя в некоторых случаях они могут образовываться, например, при работе с
материалами животного происхождения. В таких случаях нужно обратить внимание на возможность
образования биопленки и учесть, что методы обработки, изложенные в А.4.2.4.2 и А.4.2.4.10, не могут
применяться для выделения микроорганизмов, находящихся в биопленках. Наличие биопленки
можетбытьустановленопривалидацииметодоввыделения,есливысокоечисло
микробиологических частиц отмечено в повторном выделении (А.5.2.1.1).
Любая технология, применяемая при оценке бионагрузки, должна быть воспроизводимой.
Следует избегать условий, которые могут понизить жизнеспособность микрооорганизмов. таких как
чрезмерная кавитация, механические воздействия, повышение температуры или осмотический шок.
Некоторые методы легче поддаются контролю, чем другие. Изменения метода и средств
контроля этих изменений должны рассматриваться при выборе метода и выборе подходящей
комбинации изменений. Например, для данного метода может быть увеличено время или изменен
принцип механического воздействия для увеличения эффекта удаления организмов.
Некоторые методы могут дезагрегировать продукт при контроле (например, дезинтеграция,
растворение и перемешивание). Присутствие дезагрегированного материала может затруднить
подсчет количества микроорганизмов и потребовать дополнительной обработки, например, для
отделения дезагрегированного материала от элюента. Полученные при этом данные должны быть
представительными.
Образцы для тестирования следует передавать в лабораторию как можно скорее. Если
задержка передачи образцов в лабораторию неизбежна, то необходимо выбрать условия хранения
таким образом, чтобы предотвратить потерю микроорганизмов или изменения их популяции. Должно
быть указано максимальное время хранения. Высушивание может быть причиной значительного
снижения числа микроорганизмов и должно быть учтено при выборе условий и времени хранения.
А.4.2.4.2 Отмывание
Образец для контроля и известный объем элюента помещают в стерильную емкость для
отмывания. В емкости работают двухлопастные мешалки, принуждая элюент проходить через
образец и вокруг него. Метод особенно эффективен для мягких, волокнистых и/или абсорбирующих
материалов, но неприменим для любых материалов, которые могут привести в негодность емкость,
например, устройств, содержащих иглы и большие предметы.
Должно быть указано время обработки.
Этот метод может давать суспензию с низкой концентрацией микроорганизмов, поскольку
используется относительно большое количество элюента. Для последовательного подсчета могут
потребоваться другие методы, такие как фильтрация (А.4.2.6.2) или чашечный метод (А.4.2.6.3).
А.4.2.4.3 Использование ультразвука
Контролируемый образец погружают в элюент известного объема в соответствующем сосуде.
Каждый сосуд и ого содержимое обрабатываются в ультразвуковой ванне, или в содержащийся в
сосуде элюент погружают ультразвуковой зонд.
Определяют номинальную частоту ультразвука, продолжительность обработки и позиции, в
которых образцы находятся в ультразвуковой ванне. Может потребоваться ограничение числа
одновременно обрабатываемых образцов, чтобы мощности ультразвука хватило для эффективной
обработки.
Метод особенно подходит для твердых водонепроницаемых образцов и продуктов сложной
формы. Он может быть деструктивным для некоторых медицинских изделий, в особенности для
содержащих электронные компоненты, таких как имплантируемые кардиогенераторы.
Энергия ультразвука и продолжительность обработки не должны быть велики настолько, чтобы
вызвать гибель микроорганизмов или перегрев элюента.
А.4.2.4.4 Шейкинг (перемешивание встряхиванием) со стеклянными бусами и без них
Контролируемый образец погружается в сосуд с элюентом известного объема и подвергается
тряске на механическом шейкере (возвратно-поступательного, кругового или осевого действия) для
удаления микроорганизмов. Может использоваться ручной шейкер, но его эффективность зависит от
оператора. Для увеличения поверхностного трения и коэффициента выделения в шейкер могут
добавляться стеклянные бусы определенного размера. Размер стеклянных бус. время и частота
действия шейкера не должны вызывать перегрева и/или возможного повреждения микроорганизмов.
Добавление стеклянных бус может увеличить площадь поверхности, к которой могут прилипать
микроорганизмы.
Должны быть указаны время и частота действия шейкинга.
А.4.2.4.5 Вихревое смешивание
Контролируемые образцы погружают в закрытый контейнер, содержащий известный объем
8