С. В ГОСТ 2М64.4—М
Глюкозооксидаза с ферментативной активностью 100000 ед/г.
Пероксидаза.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
а.
1
д.
Приме ч а ние .
Все реактивы
должны
выть
квалификации ч.;
х. ч. или
3.3. Под гот ов к ак анализ у
3.3.1. Приготовление раствора крахмала с массовой долей 1%
(субстрата) — по п. 2.3.1.
3.3.2. Приготовление фосфатного буферного раствора с pH 7,5
концентрацией I люль дм3
Смешивают равные объемы растворов фосфорнокислого одно-
замещенного калия и гидроокиси калия концентрацией 1 моль/дм*.
Величину pH проверяют на приборе. В случае отклонения pH
от требуемого составляющими растворами доводят его до нормы.
3.3.3. Приготовление раствора железистосинеродистого калия
с массовой долей 1% (раствора А)
0,05 г железистосннероднстого калия количественно переносят
в мерную колбу вместимостью 50 см3 и объем доводят дистилли
рованной водой до метки.
Раствор готовят непосредственно перед определением.
3.3.4. Приготовление раствора глюкозооксидазы (раствора Б)
5.00 (6,00) мг глюкозооксидазы растворяют фосфатным буфер
ным раствором с pH 7,5 в мерной колбе вместимостью 50 см* в
затем добавляют 2,0 мг пероксидазы. Объем доводят до метки
фосфатным буферным раствором.
Если активность глюкозооксидазыотличается от требуемой
(100000 ед/г), то навеску берут с таким расчетом, чтобы в 50 см*
раствора содержалось 500—600 ед активности.
3.3.5. Приготовление рабочего раствора С
Рабочий раствор С готовят смешиванием равных объемов ра
створов А и Б.
Полученный раствор хранят в темной склянке в холодильнике
в течение 2—3 сут.
3.3.6. Приготовление насыщенной бензойной кислоты
2,70 г бензойной кислоты количественно переносят в мерную
колбу вместимостью 1000 см* и доводят до метки дистиллирован
ной водой.
3.3.7. Приготовление стандартных растворов глюкозы
Для приготовления стандартных растворов глюкозыпользу
ются перекристаллизованной из спирта безводной глюкозой, ко
торую хранят в эксикаторе над хлористым кальцием.
100.00 мг глюкозы растворяют в 100 см* насыщенного раствора
бензойной кислоты. Из этого раствора отбираютпоочередно 5,
10 и 15 см5 в мерной колбе вместимостью 100 см3 и доводят объем до
метки бензойной кислотой. Полученные растворы соответству ют
содержанию 50, 100 и 150 мкг глюкозы в 1 см*.