ГОСТ 2UM.4-M с. 13
4.4.2. Определение осахаривающей активности в очищенных
препаратах и культуре гриба, полученных из Asp. orугае
В коническую колбу вместимостью 50 см3 наливают 20 см*
субстрата (раствора крахмала, приготовленного на буферном ра
створе с pH 4,7), колбу закрывают часовым стеклом и помещают
в термостат или водяную баню с температурой (30.0±0,2)°С. Че
рез 10 ммы добавляют от 1 до 10 см» ферментного раствора (в за
висимости от предполагаемой активности) н содержимое тщатель
но перемешивают. Общий объем реакционной смеси должен быть
30 см». Если на определение берут меньше 10 см3 ферментного
раствора, то недостающий объем дополняют дистиллированной
водой непосредственно перед добавлением ферментного раствора.
Через 10 мин после добавления ферментного раствора действие
фермента приостанавливают добавлением 2 см3 раствора соляной
кислоты. Затем содержимое колбы количественно переносят, смы
вая дистиллированной водой, в коническую колбу вместимостью
500 см3 приливают 20 см3 раствора йода и сразу же по каплям,
при
к
тщательном
и
перемешивании, добавляют 60 см3 раствора гид
роо иси натрия ли калия.
Колбу закрывают и оставляют на 15 мин в защищенном от
света месте. Через 15 мин в раствор добавляют 2 см» серной кис
лоты и титруют выделившийся йод растворомгипосульфита в
присутствии (в качестве индикатора) растворимого крахмала до
исчезновения синего окрашивания. Раствор становится бесцвет
ным.
мостате)
Одновременно ставят контрольный опыт с темн же количества
ми всех реагентов, только ферментный раствор вводят после до
бавления
.
2 см* раствора соляной кислоты (без выдержки в тер
Разность между результатами титрования контрольного и
опытного растворов должна составлять 0,5—6 см» раствора гипо
сульфита. Если разность меньше 0,5 см* или больше 6 см», то
анализ повторяют с большим или меньшим количеством фермент
ного раствора.
4.4.3. Определение осахаривающей активности в очищенных
препаратах и в культуре гриба, полученный из Asp. awamori
Все операции по определению осахаривающей активности про
водят по п. 4.4.2 со следующим дополнением:
для прекращения ферментативной реакции добавляют 5 см*
раствора соляной кислоты. При тщательном перемешивании сна
чала
и
добавляют 3 см», затем 60 см» раствора гидроокиси натрия
(кал я).
4.4.4. Определение осахаривающей активности в очищенных
препаратах и в культуре из Вас. subtills