ГОСТ 30812—2021
На поздних стадиях зрелости у овулировавшей икры ядро как морфологическая структура исче
зает; при отдельных видах технологической обработки икры-зерна установить наличие ядра на срезе
икринки не представляется возможным;
- наличию многослойной прозрачной (полупрозрачной) оболочки, состоящей из студенистого слоя,
наружного и внутреннего, радиальных (желточных) слоев, а также по наличию многослойного строения
оболочки, которая наблюдается при варьировании угла падения света на препарат. Графические изо
бражения приведены на рисунках В.4—В.7 (приложение В);
- нарушению целостности оболочки, расслоения и набухания, образующихся при технологической
обработке и хранении. Графические изображения приведены на рисунках В.5, В.6 (приложение В);
- наличию нескольких микропиле на анимальном полюсе икринки, которые четко различимы в
икре-зерне и готовой продукции, изготовленной из икры рыб, и имеют поздние стадии зрелости ястыков
(микропиле различимы в виде темных или преломляющих свет точек при рассматривании препарата в
проходящем свете). Графические изображения приведены на рисунке В.7 (приложение В).
Наличие ядра и микропиле у икринок являются дополнительными признаками, характеризующи
ми исследуемый объект как икру семейств Осетровые и Веслоносые. Наличие микропиле определяют
в спорных случаях.
4.6 Обработка и оформление результатов идентификации
4.6.1 Результаты идентификации оценивают по каждой пробе отдельно и сопоставляют с характе
ристиками показателей, приведенными в приложениях Б, В.
4.6.2 Результаты идентификации оформляют протоколом по форме, приведенной в приложении Г.
5 Молекулярно-генетический метод идентификации
5.1 Сущность метода
Метод заключается в установлении нуклеотидной последовательности ДНК в анализируемом
образце, которую записывают в виде последовательности букв, кодирующих четыре возможных азоти
стых основания ДНК (русск. — А, Т, Г, Ц; лат. — А, Т, G, С). Для этого применяют метод секвенирования
ДНК по Сэнгеру (с использованием флуоресцентно-меченных терминаторов реакции) продукта ампли
фикации выбранного участка ДНК, полученного при помощи ПЦР После получения продукта секвени
рования ДНК проводят электрофоретическое разделение продуктов реакции секвенирования методом
капиллярного электрофореза с детекцией сигнала флуоресценции с одновременной компьютерной за
писью четырехцветной электрофореграммы, с последующим преобразованием пиков флуоресценции
продукта секвенирования ДНК в буквенный код, описывающий нуклеотидную последовательность в
анализируемом участке ДНК исследуемого образца. После получения буквенного кода последователь
ности оснований ДНК данную последовательность сравнивают с известными аннотированными после
довательностями, опубликованными в доступных базах данных с целью идентификации икры рыб.
Примечание — Планирование выполнения измерений рекомендуется проводить сучетом дополнитель
ных процедур, изложенных в инструкциях, прилагаемых к наборам. Рекомендуется изучить эти инструкции перед
планированием работ.
5.2 Общие требования и требования безопасности
5.2.1 Общие требования и требования безопасности — по 4.2.
5.2.2 К выполнению измерений и (или) обработке их результатов допускаются лица, имеющие
соответствующее высшее специальное образование, прошедшие инструктаж, владеющие техникой по
становки ПЦР и секвенирования ДНК, а также изучившие инструкции по эксплуатации применяемого
оборудования и используемых наборов.
5.3 Требования к условиям проведения испытаний
5.3.1 Требования к условиям проведения испытаний — по 4.2.
5.3.2 Для испытаний, основанных на ПЦР, дополнительным требованием является наличие от
дельных специализированных рабочих помещений с собственным оборудованием для исключения
случайной контаминации ДНК:
а) рабочая зона для экстракции нуклеиновых кислот из анализируемого материала;
7