ГОСТ 31746—2012
Приготовленный раствордопускается хранить не более 1мес при температуре (3 ± 2) °С.
5.1.5 Готовая питательная среда
5.1.5.1 Состав:
основа среды (см. 5.1.1).................................................................................... 100 см3;
раствор теллурита калия (см. 5.1.2)...............................................................1,0 см3;
эмульсия яичного желтка (см. 5.1.3)...............................................................5.0 см3;
раствор сульфаметазина (см. 5.1.4) (если необходимо)..............................2.5 см3.
5.1.5.2 Приготовление
Расплавляютоснову, затемохлаждаютдотемпературы примерно47 °С на водянойбане. Васепти
ческих условиях добавляют два других раствора и, если необходимо, раствор сульфаметазина
(см.5.1.4). Предварительнокаждыйрастворподогреваютнаводянойбанепри 47 вС. тщательнопереме
шивая среду после каждогоприбавления раствора.
5.1.6Приготовление чашек Петри с агаризованной средой Байрд-Паркера
Разливаютсоответствующееколичество готовойсреды (см. 5.1.5) в стерильныечашки Петри, что
бы получить агаровый слой толщиной примерно 4 мм, и дают застыть. Приготовленные чашки можно
хранитьдо использования 24 ч при температуре (3 ♦2) °С.
Передприменениемсредув чашках подсушиваютв сушильном шкафупри температуре от 25°С до
50 °С до тех пор. пока с поверхности среды неисчезнут капельки влаги. Предпочтительней подсушивать
среду при снятых крышках и поверхностью среды вниз.
5.2 Бульон наоснове вытяжки изсердца и мозга
5.2.1 Состав:
продукт ферментативного гидролиза животныхтканей................................10,0 г;
дегидратированная вытяжка мозга теленка...................................................12,5 г;
дегидратированная вытяжка сердца теленка................................................5,0 г,
глюкоза..................................................................................................................2.0 г,
хлорид натрия..............................................................................5.0г,
двузамещенный фосфорнокислый натрий, безводный (Na2HP04) .............2.5 г,
вода..................................................................................................................... 1000 см3.
5.2.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде.
Устанавливают pH такимобразом, чтобы послестерилизациион составлялпри температуре 25 SC
(7,4 1 0.2).
Разливают питательную среду по 5—10 см3 в пробирки. Стерилизуют среду в течение 15 мин при
температуре(121 1 1 )вС.
5.3 Плазма крови кролика
5.3.1 Свежополучоннуювасептическихусловияхиз сердцакроликакровьтщательносмешива
ют в соотношении 4:1 со стерильным раствором лимоннокислого натрия (цитрата натрия). Полу
ченную смесь центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин или отстаивают на холоде при
температуре (3 ± 2) °С. затем плазмуотсасывают пипеткой и разводят ее израсчета 1 см3плазмы
на 4 см3 физиологического раствора. Разведенную плазму по 0.5 см3разливают в стерильные про
бирки.
Если в качестве антикоагулянта плазмы использовались цитраты калия или натрия, то к плазме
добавляют раствор ЭДТА(этилендиаминтетрауксусная кислота)до концентрации ЭДТАв плазме0.1 %.
Вплазму, содержащую оксалат или гепарин ЭДТА, недобавляется.
Для приготовления агара с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном к плазме добавляюттрип
син из расчета 30 мгтрипсина на30 см3плазмы. Плазму готовят непосредственно передприменением.
Если используется готоваяобезвоженная плазма, то восстановлениеи использованиетакойплаз
мы проводят в соответствии с прилагаемой к ней инструкцией. Плазма готовится непосредственно
перед применением.
Качество плазмы тестируется с помощью коагулазоположительных и коагулазоотрицательных
штаммов стафилококков.
5.3.2 Растворлимоннокислого натрия
5.3.2.1 Состав:
лимоннокислый натрий.................................................................................... 5.0 г:
вода...................................................................................................................100 см3.
5