ГОСТ 31746—2012
8.3 Метод определения количества коагулазоположительных стафилококков посевом на
агаризованную среду
8.3.1 Из навески продуктаготовят исходное иряд десятикратныхразведений поГОСТ 26669,
таких, чтобыможно былоопределить в 1 г (см3) продуктапредполагаемоеколичествокоагулазопо-
пожитвльных стафилококков или их допускаемое количество, указанное в документе на исследуе
мыйпродукт.
Переносят с помощью стерильной пипетки 0.1—0,2 см3 продукта, если продукт жидкий, или
0.1—0.2 см3исходной суспензии в случаепродуктовдругой консистенции, на поверхностьодной изсред,
указанныхв 8.1.3.
Байрд-Паркер агар с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном используют для посева сильно
обсемененных продуктов, например, приготовленных из сырого мяса.
Для посева продукта или каждого его разведения используютдве параллельные чашки Петри со
средой. Подготовкучашек Петри со сродой к посеву и посев проводятпо ГОСТ26670и 5.1.6.
Если необходимо, повторяют процедурудля исходного разведения, если продукт жидкий, или для
десятикратного разведения других продуктов, а такжедля последующихдесятикратных разведений.
Для посева в качестве арбитражнойсреды используют Байрд-Паркер агар.
8.3.2 Если для некоторыхпродуктов необходимоопределитьнебольшоеколичествокоагулазопо
ложительных стафилококков, то пределы обнаружения метода можно повысить в 10 раз за счет посева
1см3продукта, если продукт жидкий, или 1см3исходной суспензии в случае других продуктов. По 1см3
высеваютнаповерхностьсреды в однойбольшойчашкеПетри (диаметром 140 мм) либонаповерхность
среды в трех маленьких чашках Петри (диаметром 90 мм). В обоих случаях высевают параллельные
навески, используядля этого две большиечашки Петри или шесть маленьких.
8.3.3 С помощью стерильного шпателя осторожно ибыстро распределяют посевной материал по
поверхности агаризованной среды вчашке Петри, стараясь не касатьсястенокчашки. Примерно в тече
ние 15 миндают подсохнуть поверхности среды под крышками по ГОСТ26670.
8.3.4 Чашки Петри с посевами переворачивают крышками вниз и инкубируют в термостате при
температуре (37 ♦ 1) °С в течение 24—48ч.
8.3.5 После инкубирования втечение (24 ± 2)ч чашки Петри спосевами просматриваюти отмена-
ютна обратнойсторонечашкиположениетипичныхи атипичныхдля коагулазоположительныхстафило
кокков колоний.
Характеристика типичных иатипичных колоний — по8.1.4.
8.3.6 Все чашки Петри с посевами по8.3.5 продолжают инкубировать при температуре (37 11) °С
в течение еще (24 • 2) ч. послечего отмечают появление новыхтипичных и атипичных колоний.
Для подсчета берут чашки Петри, на которых выросло максимум 300 колоний, по 150 типичных
и/илиатипичныхколонийдлядвух последовательныхразведений. ВпосевахначашкахПетринедолжно
быть менее 15 колоний. Выбираютдля подтверждения на каждой чашке Петри пять типичных колоний,
если присутствуют только типичные колонии, и пять атипичных колоний, если присутствуют только ати
пичные колонии, или пять типичных колоний и пять атипичных, если присутствуют оба типа колоний.
Если на чашкахПетри, засеянных неразбавленным жидким продуктом или самым меньшим разведени
ем других продуктов, имеется менее 15 типичных и (или) атипичных колоний, то отбирают все парал
лельные чашки Петри, на которых имеются типичные или атипичные колонии. Отбирают колонии для
подтверждения в количествах, указанных выше.
8.3.7 Каждую отобранную колонию отдельно пересевают по8.1.5. Посевы инкубируют при темпе
ратуре (37 ± 1)°С в течение (24 ± 3)ч.
8.3.8 Если 1см3посевного материала распределили по трем чашкам по 8.3.2, то принимают эти
чашки Петри за одну при всехпоследующихподсчетах ипроцедурах подтверждения.
8.4 Метод определения количества коагулазоположительных стафилококков посовом в
агаризованную среду
8.4.1В каждую из двух чашек Петри вносят с помощью стерильной пипетки 1см3продукта, если
продуктжидкий, или 1см3исходной суспензии в случае продуктовдругой консистенции.
В две другие стерильные чашки Петри вносят по 1см3исходной суспензии жидкого исследуемого
продукта или первогодесятикратного разведения в случае продуктовдругой консистенции.
Повторяют эту процедуру для последующих разведений, используя для каждого разведения
новую стерильную пипетку.
Посевы заливают Байрд-Паркер агаром с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном или одной
изагаризованныхсред, указанных в 8.1.1. слоем приблизительно 3—4 мм.
12