ГОСТ 31746—2012
5.3.2.2 Приготовление
Лимоннокислый натрий помещают в колбу, растворяют в воде. Раствор доводят до метки,
разливают по колбам или пробиркам и стерилизуют притемпературе (121 ± 1)°С в течение 20 мин.
5.4Агаризованная среда с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном
Следует учитывать опыт использования готовых партий добавок. Рекомендуется каждую партию
растворабычийфибриноген/кроличьяплазмаподвергатьтестированию путем постановкиположитель
ного иотрицательного контроля.
5.4.1 Основа среды
Основу среды готовят по 5.1, но перед стерилизацией среду разливают по 90 см3 в колбы или
флаконы.
5.4.2 Раствор бычього фибриногена
5.4.2.1 Состав:
бычий фибриноген.............................................................................................5—7 r,J-
стерильная вода...............................................................................................100 см .
5 4.2.2 Приготовление
С соблюдением правил асептики растворяют бычий фибриноген в воде непосредственно перед
использованием.
5.4.3 Кроличья плазма и трипсин ингибирующий раствор
5.4.3.1 Состав:
кроличья плазма с ЭДТАдля коагулазы (ЭДТАкоагулазная плазма). . . . 30 см3;
трипсин ингибитор.............................................................................................30 мг.
5.4.3.2 Приготовление
Раствор готовят с соблюдением правил асептики, растворяют компоненты в воде непосредствен
но перед использованием.
Если используют готовый растворбычийфибриноген/кроличья плазма, тонеобходимособлюдать
инструкцию поприготовлениюданного раствораиготовойсреды. Особеннонадообращатьвниманиена
температуруосновы среды. При несоблюдении температуры среда может потерятьсвою активность.
5.4.4 Готовая среда
5.4.4.1 Состав:
основа среды (см. 5.4.1)....................................................................................90 см3;
раствор теллурита калия (см. 5.1.2)...............................................................0.25 см3;
раствор фибриногена (см. 5.4.2)....................................................................7.5 см3:
кроличья плазма и трипсин ингибирующий раствор (см. 5.4.3)...................2.5 см3.
5.4 4.2 Приготовление
Расплавляют основусреды, охлаждаютв водяной банедо температуры (47 ± 1)°С. Ссоблюдением
правил асептики прибавляют три раствора, предварительно подогретых до (47 ♦ 1) °С в водяной бане.
Тщательно перемешивают среду вращением после каждого прибавления, минимизируя вспенивание.
Используют готовуюсреду непосредственнопосле приготовления, тем самым избегая преципита
ции плазмы.
5.5 Модифицированный Жиолитти-Кантони бульон
5.5.1 Основа среды
5.5.1.1 Состав модифицированногоЖиолитти-Кантони бульона приведен втаблице 1.
Т а б л и ц а 1
Наименование компонента
Среда двойной
концентрации
Среда нормальной
концентрации
Ферментативный гидролизат казеина
Мясной экстракт
Дрожжевой экстракт
Хлористый литий
Маннит
Хлористый натрий
Глицин
Пируват натрия
Полиоксиэтилен сорбитан моноолеат (теин-80)
Вода
20.0
Г
10.0 Г
10.0 Г
10,0 г
40.0 Г
10,0
г
2.4 г
6.0
г
2.0
г
1000 си3
10.0 г
5.0 г
5.0 г
5.0 г
20.0
г
5.0 г
1.2
г
3.0 г
1.0 г
1000
cmj
" Зависит от чистоты бычьего фибриногена.
6