ГОСТ 31746—2012
зрачнойзоной, диаметр колоний около 1,0—1.5мм идо 1,5—2,5 мм послеинкубирования втечение48 ч.
После инкубирования в течение 24 ч непосредственнооколо колонии в прозрачной зоне может появить ся
опалесцирующее кольцо, окружающее колонию.
На Байрд-Паркер агаре с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном коагулазоположительные
стафилококки образуют черные или серые, или ровные белые мелкие колонии, окруженные зоной пре
ципитации, указывающей на коагулазную активность.
Бактерии рода Proteus могут вырастать и в начале инкубирования быть похожими на коагулазопо-
ложительные стафилококки, но после 24 или48 ч инкубированияпоявляются стелющиеся культуры раз
ногооттенка коричневого цвета, что позволяетотличить ихотстафилококков.
На молочно-солевом агаре колонии коагулазоположительных стафилококков круглые, слегка
возвышающиеся над поверхностью агара, с ровными краями, диаметром 2.0—2.5 мм. окрашены в
желтый, золотистый, лимонно-желтый, кремовый, палевый или белый цвет.
На яично-желточно-азидном и яично-желточно-солевом агаре колонии коагулазоположитель-
ных стафилококков окружены зонойлецитиназной активности.
Крометипичных, коагулазоположительныестафилококки могутобразовыватьатипичные колонии.
Атипичные колонии на Байрд-Паркерагаре могут представлятьодну из следующих морфологий:
а) блестящиечерные колониис узкой белойкромкойили безнее; прозрачнаязона отсутствуетили
едва видима, аопалесцирующее кольцоотсутствует илитрудно различимо;
б) серые колонии без прозрачныхзон.
Все колонии, возможно присутствующие на чашках Петри ине показавшие типичных иатипичных
признаков, относятся кфоновой флоре.
Микроорганизмы, принадлежащие к родам, отличным от коагулазоположительиых стафилокок
ков. могут образовывать колонии, которые по внешнему виду похожи на колонии коагулазоположитель-
ныхстафилококков. Исследование подмикроскопом препаратов, окрашенных по Граму, иопределение
наличия каталазы облегчаетотличие стафилококков от других родов.
После дополнительной инкубации всех чашек Петри при температуре 37 °С в течение (24 ± 2) ч
фиксируют появление новых типичных иатипичных колоний.
8.1.5Для подтверждения принадлежности типичных и атипичных колоний к коагулазоположи-
тельным стафилококкам отбирают не менее пяти типичных и/илиатипичных колоний.
Для подтверждения принадлежности отобранных типичных иатипичных колоний к коагулазополо-
жительным стафилококкам пересевают каждую отобранную колонию отдельно в жидкую среду, приго
товленную по 5.2, и на поверхность одной из скошенных питательных сред — мясопелтонного агара,
приготовленного по 5.8. или среды, приготовленной изсухого ГРМ-arapa по5.10.
Посевы инкубируют при температуре (37 • 1) °Св течение (24 ± 3) ч.
8.2Метод НВЧ — определение количества коагулазоположительных стафилококков
8.2.1 Каждую навеску исследуемого продукта и (или) его разведение в трехкратной повторности
высеваютв пробирки с одной из сред, приготовленных по 5.5 или 5.9.
8.2.2 При определении количества коагулазоположительныхстафилококков пометоду НВЧвысе
ваютне менеетрех последовательных навесокисследуемогопродукта и(или)его разведения, отличаю
щиеся по количеству продукта в них в 10 раз.
В каждую из трех пробирок со средойдвойной концентрации вносят по 10 см3 пробы жидкого про
дукта или по 10 см3первогоразведения (т. е. 1г пробы) продуктадругой консистенции.
В каждую изтрехпробироксосредой нормальнойконцентрации вносятпо 1см3пробыжидкого про
дукта или 1см3первого разведения (т. е. 0,1 гпробы) других продуктов.
Для каждого последующегоразведения (т. в. 10 ’. 10-2,10-3— дляжидких продуктовили 10-2.10~3
или 10*4для продуктов другой консистенции), процедуру повторяют, как указано выше, используя све
жую стерильную пипеткудля каждого разведения.
Готовят такое число разведений, чтобы в конечном разведении получить три отрицательных
результата.
Осторожно перемешивают инокулят сосредой, избегая внесения воздуха.
Подготовка Жиолитти-Кантони бульона к посеву, создание анаэробных условий для роста микро
организмов — по 8.1.1.
8.2.3 Инкубирование пробирок с посевами, пересев выросших культур на селективно-диагности
ческие среды, отбор типичных и атипичных колоний, их пересевдля подтверждения присутствия коагу
лазоположительныхстафилококков проводят по 8.1.2—8.1.5.
11