ГОСТ 31746—2012
Перед использованием Жиолитти-Кантони бульон прогревают кипячением при (100
1
1) °С в тече
ние 15 мин дляудалениявоздуха. Охлаждаютдо44 °С—47 °Сиссоблюдением правиласептики прибав
ляют раствор теллурита калия.
В 10 см3 модифицированного Жиолитти-Кантони бульона нормальной концентрации или сред
(см. 5.9) вносят 1 см3жидкогопродукта или 1 см3исходнойсуспензии (т.е. 0,1 гили 0,1 см3продукта)илив
10 см3Жиолитти-Кантони бульона двойной концентрации вносят 10 см3 жидкого продукта или 10 см3
исходнойсуспензии(т. е. 1 гили 1см3продукта). Для посева большихобъемовнавески испытуемогопро
дукта приготавливают исходную суспензию, для этого х см3 или х г продукта прибавляют к 9 х
см3 разбавителя. Затем прибавляют всю исходную суспензию к 9 х ■10 см3 модифицированного
Жиолит ти-Кантони бульона нормальной концентрации (например. 5 см3или 5 г вносят в 45
см3разбавителя и затем эту всю исходную суспензию вносят в 450 см3модифицированного
Жиолитти-Кантони бульона нормальной концентрации). Оставляют минимум воздушногопространства
в пробирке или флаконе.
После посева навески продукта и(или)его разведений на поверхностьЖиолитти-Кантонибульона
осторожно наслаивают слой стерильного голодного агара или слой стерильного парафина, приготов
ленных по ГОСТ 10444.1 и охлажденныхдо температуры 44 °С—47 °С , дают полученному слою агара
или парафина застыть и герметично закрывают.
Соотношение между количеством высеваемого продукта илиего разведением и питательной сре
дой нормальной концентрации 1:10. При использовании среды двойной концентрации соотношение
между количеством высеваемого продукта или его разведением ипитательнойсредой 1:1.
Если при последующем подтверждении принадлежности коагулазололожительных стафило
кокков к S. aureus не определяют наличие термостабильной нуклеазы и гемолитической активнос
ти. тодопускаетсяпроводитьпосев в Жиолитти-Кантони бульон безпрогревапередпосевом и без
наслаиванияголодного агара или парафина послепосева.
ПрииспытаниивысококислотныхпродуктовдляпредотвращениярезкогосниженияpH (на0.5и
более) питательных средpH питательных сред после внесения в них продукта или его разведений
доводят до допустимых значений с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия, приготов
ленного по ГОСТ
1
0444.
1
,илипри приготовлении питательныхсредpHустанавливаютвыше задан
ного с учетом его последующего снижения при внесении продукта. Количество добавляемого
растворагидроокисинатрияиливеличину, накоторуюнеобходимоувеличитьpHприприготовлении
питательных сред, устанавливают опытнымпутем.
Допускается доводитьpH до нейтрального значенияс помощью стерильногораствора гидро
окисинатрияв самом высококислотномпродукте.
При анализе пищевых продуктов с большим содержанием хлористого натрия (NaCI) посев
исследуемогопродуктаилиегоисходногоразведенияв солевойбульоннепроводят. Содержаниехло
ристогонатрия (NaCI) впосевах не должно быть более 6.5 %—7%.
8.1.2 Посевы инкубируют при температуре (37 11) °С в течение (24 12) ч. Если появилось
почернение или черный осадок в Жиолитти-Кантони бульоне или помутнение в солевом или сахарном
бульоне, то проводят подтверждение принадлежности выросших микроорганизмов к коагулазоположи-
тельиым стафилококкам. Если почернения, черного осадка или помутнения нет, то посевы инкубируют
еще (24 ± 2)ч.
8.1.3 Для полученияизолированных колонийстерильнойпетлейделаютпересевы культуризкаж
дого посева (см. 8.1.2) на поверхностьчашки Петри содной изагаризованныхселективно-диагностичес
ких сред. Байрд-Паркер агара. Байрд-Паркер агара с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном,
молочно-солевого агара, яично-желточно-азидного агара или яично-желточно-солевого агара
(см. раздел 5).
Пересевы проводят также из пробирок, в которых нет видимых признаков роста.
Если на поверхность Жиолитти-Кантони бульона наслаивали голодный агар или парафин, то
перед пересевом, с соблюдением правил асептики, их удаляют, используя для этого стерильный шпа
тель. Шпателем режутслойагара на четыре части вдоль и.если необходимо, вставляютшпательв про
биркуипроводятпоокружностиагарадляосвобожденияегоот стеклапробирки. Взбалтываютпробирку,
вызывая разбивание слоя и выпадения его надно пробиркидля обеспечения ровной поверхности куль
туральной суспензии.
Чашки Петри с пересевами инкубируют в термостате при температуре (37
1
1) °С в течение
(24
1
2)чили (48 ±2)ч.
8.1.4 После 24 ч инкубирования чашек Петри по8.1.3 отмечают на дне чашек присутствие типич
ных иатипичныхдля коагулазололожительныхстафилококков колоний.
На Байрд-Паркер агаре после инкубирования в течение 24 ч коагулазоположительные стафило кокки
образуют типичные колонии черного или серого цвета, блестящие и выпуклые, окруженные про-
ю