ГОСТ 31746—2012
5.5.1.2 Приготовление
При нагревании и помешивании растворяют компоненты или дегидратированную основу в воде.
Охлаждаютдо комнатной температуры и устанавливают pH так, чтобы после стерилизации он состав
лял (6.9
1
0,2) при температуре 25 9С.
Разливают среду в соответствующем количестве в пробирки соответствующего объема —
16 х 160 мм для среды нормальной концентрации и20 * 200 мм — для среды двойной концентрации.
Стерилизуют в автоклаве при температуре (121 ± 1)*С в течение 15 мин.
5.5.2 Готовая среда
Перед использованием в водяной бане прогреваютоснову среды 15 мин при 100 °С для удаления
воздуха.
Охлаждают до 44 °С—47 °С, асептически прибавляют раствор теллурита калия по 5.1.2, внося
0,1 см3на пробирку в среду нормальной концентрации и 0,2 см3в пробирку со средой двойной кон
центрации.
5.6 Голодный агар
Голодныйагар готовят по ГОСТ 10444.1.
Пород использованием охлаждают до 44 9С—47 °С. Наливают в пробирки соответствующего
объема.
5.7 Молочно-солевой агар
Молочно-солевой агарготовят поГОСТ 10444.1.
5.8 Мясопептонный агар (бульон)
Мясопептонныйагар (бульон) готовят по ГОСТ 10444.1.
5.9 Солевой или сахарный бульон
5.9.1 Состав:
мясопептонный бульонпо ГОСТ 10444.1 .................................................... 100 см3.
хлористый натрий..........................................................................................6.0 г;
илиглюкоза......................................................................................................1.0г. 5.9.2
Приготовление
Вмясо-пептонномбульонерастворяют 6.0гхлористогонатрияили 1.0 гглюкозы, устанавли
ваютpHтак. чтобыпослестерилизациионсоставлялпритемпературе25 °С(6.9 L 0.1). Бульонраз
ливают в колбы илипробирки и стерилизуют притемпературе (121± 1) °Св течение 15мин.
5.10 ГРМ-агар (сухой питательный агар для культивирования микроорганизмов на
основе гидролизата рыбной муки)
2
Средуготовят поинструкции, указанной на этикетке.
5.11 Среда сДНК
5.11.1 Состав:
трисаминомотан.............................................................................................6.1 г:
дезоксирибонуклеиноваякислота (ДНК)...................................................... 0.3 г;
хлористыйнатрий..........................................................................................10.0 г:
раствор хлористого кальция......................................................................... 1,1 с/л3;
агар....................................................................................................................15.0 г:
раствор толуидина синего............................................................................9,2см3
5.11.2 Приготовление
Вводе растворяюттрисаминомотани доводят по ГОСТ 10444.1 pH растворадо (9.0 .0.1).
КрастворудобавляютДНК. хлористыйнатрий, растворхлористого кальция, агарнагревают
до полногорасплавления агара. К охлажденной до температуры 65 °С—55 °Ссреде добавляютрас
твор толуидина синего «С», тщательно перемешивают и разливают по стерильным чашкам
Петри.
Допускаетсяхранение среды при температуре (3 ± 2) °Сне болев 7 сут.
5.11.3 Раствор хлористого кальция
5.11.3.1 Состав:
хлористыйкальций (С аО Д............................................................................0.1 г:
вода.....................................................................................................................100 см3.
5.11.3.2 Приготовление
Хлористый кальций переносят в колбу вместимостью 100 см3, растворяют в воде. Раствор
доводят водой дометки.
7