ГОСТ I» 51446-99
где А/ -индекс НВЧ, взятый из таблицы Б.1 для базового разведения У0;
F— число, обратное коэффициент)’ разбавления исходной пробы. Это разведение (1.0) исполь
зовано в таблице Б.1 как базовое разведение (обычно F - 10,100 и т. д.);
Vs — заданный объем, выбранный для выражения содержания микроорганизмов;
Уп — объем. использованный для посева базового разведения.
Если наименьшее разведение из отобранных соответствует пробирке, приготовленной из среды
двойной концентрации (посев 10 см3), индекс НВС, взятый из таблицы Б.1, делят на 10.
Если НВЧ меньше 0.3 микроорганизмов в 1см3(жидкие продукты) или в 1г (другие продукты)
и если была использована методика, предназначенная для малых количеств микроорганизмов,
результаты должны выражаться следующим образом: менее 1 микроорганизма в 1см3 для жидких
продуктов или 1г для прочих продуктов.
ПРИМЕР. Для твердого продукта установлен индекс НВС, равный 24; первая выбранная
пробирка соответствует посеву 1см3 исходной суспензии (/’= 10), отсюда С,, в г составляет
С5 =2410 = 2,4 • 102.
9.4.5 Доверительные пределы
Доверительные пределы приведены в таблице Б.1.
Учитывая, что при использовании методов НВЧ наблюдается значительный разброс результа
тов. они должны использоваться с осторожностью.
9.5 Метод обнаружения
Метод обнаружения —это метод, который определяет наличие или отсутствие микроорганиз
мов в заданном объеме продукта.
9.5.1 Сущность метода
Если не установлено иное в конкретных стандартах на методы испытаний, количество F
испытываемого продукта смешивают (жидкие продукты) или гомогенизируют (прочие продукты)
с 9 р см3 или г элективной или селективной жидкой среды. После термостатирования,
желательно в бане с терморегулятором (по 4.9), распределяют бактериологической петлей
выросшую культуру на поверхности селективной агаровой среды таким образом, чтобы
получить изолированные колонии. После термостатирования несколько колоний (обычно пять)
подвергают идентификации.
В некоторых случаяхдля ожиатения микроорганизмов, подвергшихся стрессовым воздействи
ям, желательно предварить обогащение элективной или селективной жидкой среды обогащением
питательного бульона. Иногда имеет смысл использовать для тех же целей две или более элективные
или селективные жидкие среды, а также две или более селективные агаровые среды.
9.5.2 Оценка результатов
Если искомый микроорганизм обнаружен, результат выражают следующих! образом:
- «обнаружен, при этом указывается навеска исследуемого продукта».
Если искомый микроорганизм отсутствует, результаты выражают следующим образом:
- «не обнаружен, при этом указывается навеска исследуемого продукта*.
Ни при каких обстоятельствах результат не распространяют на иное, большее количество
продукта.
9.6 Основные методы идентификации
9.6.1 Приготовление чистых культур
9.6.1.1 Общие положения
Приготовление чистых культур начинают с выделения колоний на/или в агаровой среде,
которая была засеяна разведением испытуемой пробы или культурой.
Выделенную колонию затем пересеивают на неселективную агаровую среду. После термоста-
тирования выделяют хорошо изолированную колонию. В случае необходимости повторяют пересев.
Используют метод посева на агар в чашках Петри, описанный в 9.6.1.2. В особых случаях могут
быть использованы и другие методы. Для анаэробных микроорганизмов может также применяться
методика, приведенная в 9.6.1.2, с условием, что культура будет контактировать с воздухом
минимально короткое время.
9.6.1.2 Рассев
Кончиком стерильной петли берут небольшое количество материала с поверхности хорошо
изолированной колонии. Затем рассеивают или непосредственно клетки, присутствующие на петле
(9.6.1.2.1), или суспензию этих клеток после ее приготовления (по 9.6.1.2.2).
20