ГОСТ 32031—2022
Расплавленную основу среды (см. Б.10.1.1) охлаждают до температуры (47 ± 2,0) °С, добавляют активи
рованный уголь (см. Б.10.1.2) и желточную эмульсию (см. Б.10.1.3), тщательно перемешивают и разливают по (20
± 5) см3в стерильные чашки Петри и после застывания подсушивают в термостате при температуре (37 ± 1) °С в
течение (40 ± 5) мин.
Б.10.2 Лецитин-агар без угля
Б.10.2.1 Основа среды
Состав:
панкреатический гидролизат рыбной муки........................................15,0 г
10,0 г
2,0 г
3,5 г
1,0 г
(10,0 ±2,0) г
1000 см3
панкреатический гидролизат казеина................................................
экстракт дрожжевой............................................................................
натрий хлорид.....................................................................................
глюкоза................................................................................................
агар......................................................................................................
дистиллированная вода.....................................................................
Приготовление
Компоненты или сухую готовую среду растворяют вдистиллированной воде, кипятят в течение 2 мин до пол
ного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в стерильные колбы и флаконы и
стерилизуют автоклавированием при температуре 121 °С в течение 15 мин.
Б.10.2.2 Эмульсия яичного желтка
Поверхность яйца обрабатывают этиловым спиртом, стерильным пинцетом пробивают с двух сторон отвер
стия и через одно из них полностью удаляют белок. Желток выливают в стерильную колбу.
Для приготовления желточной эмульсии кодному желтку с соблюдением правил асептики добавляют 150 см3
стерильного фосфатно-солевого буфера (PBS) (см. Б.11) и тщательно перемешивают до получения однородной
массы.
Б.10.2.3 Готовая среда
Состав:
основа среды (см. Б.10.2.1)................................................................100 см3
желточная эмульсия (см. Б.10.2.2)....................................................5 см3
Приготовление
Расплавленную основу среды (см. Б.10.2.1) охлаждают до температуры (47 ± 2,0) °С, добавляют желточную
эмульсию (см. Б.10.2.2), тщательно перемешивают и разливают по (20 ± 5) см3в стерильные чашки Петри и после
застывания подсушивают в термостате при температуре (37 ± 1) °С в течение (40 ± 5) мин.
Б.10.3 Среда и реактивы для реакции Фогеса-Проскауэра (VP)
Б.10.3.1 Основа среды
7,0 г
5,0 г
5,0 г
1000 см3
Состав:
протеозный пептон..............................................................................
хлорид натрия.....................................................................................
глюкоза.................................................................................................
дистиллированная вода......................................................................
Приготовление
Компоненты растворяют вдистиллированной воде, нагревая при необходимости.
Устанавливают pH среды таким образом, чтобы после стерилизации его значение составляло
(6,9 ± 0,2) ед. pH при 25 °С. Разливают среду в пробирки по 3 см3 и стерилизуют в автоклаве при температуре
121 °С в течение 15 мин.
Б.10.3.2 Спиртовой раствор а-нафтола
Состав:
а-нафтол..............................................................................................5,0 г
этанол, 96 % (объемная доля)...........................................................100 см3
Приготовление
Растворяют а-нафтол в этаноле.
Б.10.3.3 Раствор гидроксида калия
Состав:
гидроксид калия................................................................................... 40,0 г
дистиллированная вода......................................................................100 см3
27