ГОСТ 32031—2022
Б.2 Селективные среды вторичного обогащения
Б.2.1 Бульон Фразера (Fraser broth)
Б.2.1.1 Основа среды
5,0 г
5,0 г
5,0 г
5,0 г
20,0 г
12,0 г
1,35 г
1,0 г
3,0 г
0,1 г
1000 см3
Состав:
мясной пептон (пептический перевар животной ткани)..................
триптон (ферментативный гидролизат казеина).............................
мясной экстракт.................................................................................
дрожжевой экстракт..........................................................................
хлорид натрия....................................................................................
натрий фосфорнокислый двузамещенный......................................
калий фосфорнокислый однозамещенный......................................
эскулин...............................................................................................
хлорид лития......................................................................................
натриевая соль налидиксовой кислоты...........................................
дистиллированная вода ....................................................................
Приготовление
Компоненты или сухую готовую среду растворяют вдистиллированной воде, нагревая ее при необходимости.
Устанавливают pH среды таким образом, чтобы после стерилизации его значение составляло
(7,2 ± 0,2) ед. pH при температуре 25 °С. Разливают основу среды в колбы или флаконы соответствующе
го объема в количестве необходимом для проведения анализа и стерилизуют в автоклаве при температуре
121 °С в течение 15 мин.
Б.2.1.2 Растворы селективных добавок
Б.2.1.2.1 Раствор акрифлавина гидрохлорида — по Б.1.1.2.3.
Б.2.1.2.2 Раствор цитрата аммонийного железа (III) — по Б.1.1.2.4.
Б.2.1.3 Готовая среда
Приготовление
В пробирки с 10 см3основы среды (см. Б.2.1.1) добавляют по 0,1 см3раствора акрифлавина гидрохлорида
(см. Б.2.1.2.1) и раствор цитрата аммонийного железа (III) (см. Б.2.1.2.2) непосредственно перед использованием.
Б.2.2 Селективный накопительный бульон (UVM II)
Б.2.2.1 Основа среды
Согласно Б.1.2.
Б.2.2.2 Раствор акрифлавина гидрохлорида
Состав:
акрифлавин гидрохлорид..................................................................13 мг
стерильная дистиллированная вода................................................10 см3
Приготовление
Акрифлавин гидрохлорид растворяют в стерильной дистиллированной воде.
1000 см3
4,44 см3
Б.2.2.3 Готовая среда
Состав:
основа среды (см. Б.2.2.1)..................................................................
раствор акрифлавина гидрохлорида (см. Б.2.2.2).............................
Приготовление
К 1000,0 см3основы среды (см. Б.2.2.1) добавляют раствор акрифлавина гидрохлорида (см. Б.2.2.2).
Б.2.3 Питательный бульон для выделения и культивирования листерий (ПБЛ II)
Б.2.3.1 Основа среды
Согласно Б.1.3.
Б.2.3.2 Раствор селективной добавки
Состав:
налидиксовая кислота.......................................................................... 10 мг
акрифлавин гидрохлорид....................................................................5мг
полимиксин В сульфат......................................................................... 5мг
стерильная дистиллированная вода..................................................5см3
Приготовление
Налидиксовую кислоту, акрифлавин гидрохлорид и полимиксин В сульфат растворяют в стерильной дис
тиллированной воде.
16