ГОСТ 32031—2022
9.4.2 Чашки с посевами на первой плотной селективной среде (см. 9.4.1) культивируют в термо
стате при температуре (37 ± 1) °С в течение 24—48 ч.
Чашки с посевами на второй плотной селективной среде инкубируют согласно инструкции произ
водителя питательных сред.
9.4.3 Через (24 ± 3) ч или (48 ± 2) ч [если после (24 ± 3) ч отмечен слабый рост культуры или его
отсутствие] культивирования на первой и второй плотной селективной средах (10.4) учитывают наличие
колоний с ростом характерных для бактерий рода Listeria и Listeria monocytogenes.
9.4.3.1 На первой селективной плотной среде бактерии вида L. monocytogenes и L. ivanovii растут
в виде сине-зеленых колоний, окруженные непрозрачным ореолом (типичные колонии). Другие виды
бактерий рода Listeria также растут в виде сине-зеленых колоний, но без ореола.
Примечания
1 Некоторые штаммы L. monocytogenes могут давать очень слабый ореол помутнения питательного агара
вокруг колонии или вовсе не иметь его. Это характерно для «поврежденных» клеток L. monocytogenes (например,
вследствие воздействия кислот).
2 Некоторые штаммы L. monocytogenes характеризуются пониженной фосфатидилинозитолфосфолипазной
С активностью. Для выявления таких штаммов требуется более продолжительное культивирование.
3 После инкубации посевы на плотных селективных средах до начала следующих тестов допускается хра
нить не более двух дней при температуре 5 °С .
9.4.3.2 Посевы на второй плотной селективной среде просматривают на наличие колоний с ро
стом, характерным для бактерий рода Listeria.
На Палкам агаре все виды бактерий рода Listeria формируют мелкие серовато-зеленые или олив
ково-зеленые колонии с черным ореолом, иногда с черным центром.
На Оксфорд агаре все виды бактерий рода Listeria формируют мелкие сероватые колонии, окру
женные черным ореолом.
На ПАЛ все виды бактерий рода Listeria формируют мелкие серовато-желтые колонии с черным
ореолом.
На Бриллианс Listeria агаре (BRILLIANCE LISTERIA agar) бактерии L. monocytogenes и L. ivanovii
растут в виде сине-зеленых колоний, окруженные непрозрачным ореолом (типичные колонии). Другие
виды бактерий рода Listeria растут в виде сине-зеленых колоний, но без ореола.
9.4.3.3 При отсутствии колоний с ростом, характерным для Listeria monocytogenes и рода Listeria
(Listeria spp.) как на первой, так и на второй плотных селективных средах, исследование прекращают и
делают заключение, в зависимости от поставленной задачи, об отсутствии в исследуемой пробе бакте
рий Listeria monocytogenes или рода Listeria (Listeria spp.).
9.5Подтверждение принадлежности выделенных культур к роду Listeria
9.5.1 Выбор колоний для подтверждения
9.5.1.1 С каждой чашки с плотной селективной средой (см. 9.4.3) отбирают по пять колоний с
ростом, характерным для бактерий рода Listeria.
Если на чашке выросло менее пяти типичных колоний, отбирают их все.
9.5.1.2 Отобранные колонии пересевают на поверхность подсушенного плотного неселективного
питательного агара (см. 6.5.1.1—6.5.1.3) так, чтобы получить изолированные колонии.
Посевы культивируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч.
На плотных неселективных питательных средах бактерии Listeria spp. растут в виде выпуклых,
бесцветных и непрозрачных колоний в диаметре от 1,0 до 2,0 мм. Когда чашку Петри просматривают на
свету (искусственном или естественном) под углом около 45°, колонии имеют сине-серый цвет и
зернистую поверхность.
Достаточно одной подтвержденной типичной колонии на образец. Если первая колония будет от
рицательна, для проведения идентификации используют остальные отобранные колонии.
Для подтверждения принадлежности выделенной культуры к бактериям рода Listeria проводят
тесты, приведенные в таблице 1.
7