ГОСТ 32031—2022
Б.3.1.1.5 Готовая среда
Состав:
основа среды (см. Б.3.1.1.1).............................................................
раствор налидиксовой кислоты (см. Б.3.1.1.2.1).............................
раствор цефтазидима (см. Б.3.1.1.2.2).............................................
раствор полимиксина В сульфата (см. Б.3.1.1.2.3)..........................
раствор цикпогексимида (см. Б.3.1.1.3.1)........................................
или амфотерицина В (см. Б.3.1.1.3.2)..............................................
дифференциальная добавка (см. Б.3.1.1.4)....................................
930,0 см3*
5,0 см3
5,0 см3
5,0 см3
5,0 см3
10,0 см3
50,0 см3
Приготовление
В расплавленную и охлажденную на водяной бане до температуры (47 ± 2) °С основу среды (см. Б.3.1.1.1)
добавляют растворы ингибиторов (см. Б.3.1.1.2.1, Б.3.1.1.2.2, Б.3.1.1.2.3), антибиотиков (см. Б.3.1.1.3.1, Б.3.1.1.3.2) и
дифференциальную добавку (см. Б.3.1.1.4), тщательно перемешивая после каждого добавления.
pH готовой среды должен составлять (7,2 ± 0,2) ед. pH.
Готовая среда должна быть гомогенной и непрозрачной.
В стерильные чашки Петри разливают свежеприготовленную готовую среду приблизительно по 15—20 см3и
дают агару затвердеть.
Непосредственно перед применением среда в чашках должна быть подсушена в соответствии с
ГОСТ ISO 11133.
Б.3.1.2 Оценка качества первой среды
Определение селективности и продуктивности питательной среды необходимо проводить согласно
ГОСТ ISO 11133.
Б.3.2 Вторая селективная среда для посева
Б.3.2.1 Оксфорд агар (Oxford agar)
Б.3.2.1.1 Основа среды
23,0 г
1,0 г
5,0 г
1,0 г
0,5 г
15,0 г
9,0—18,0 г**
1000,0 см3
Состав:
пептон....................................................................................................
крахмал.................................................................................................
хлорид натрия.......................................................................................
эскулин..................................................................................................
цитрат аммонийного железа (III).........................................................
хлорид лития.........................................................................................
агар........................................................................................................
дистиллированная вода.......................................................................
Приготовление
Компоненты или сухую готовую среду растворяют вдистиллированной воде при нагревании.
Устанавливают pH среды таким образом, чтобы после стерилизации его значение составляло (7,0 ± 0,2) ед. pH.
Разливают основу среды в колбы или флаконы соответствующего объема и стерилизуют вавтоклаве при темпера
туре 121 °С в течение 15 мин.
Б.3.2.1.2 Раствор селективной добавки
Состав:
циклогексимид......................................................................................
сульфат колистина (полимиксин Е )....................................................
акрифлавин гидрохлорид....................................................................
цефотетан.............................................................................................
фосфомицин.........................................................................................
этанол....................................................................................................
дистиллированная вода.......................................................................
400,0 мг
20,0 мг
5,0 мг
2,0мг
10,0 мг
5,0 см3
5,0 см3
Приготовление
Компоненты добавки растворяют в смеси этанола и воды. Стерилизуют раствор фильтрованием.
Б.3.2.1.3 Готовая среда
Приготовление
В расплавленную и охлажденную на водяной бане до температуры (47 ± 2) °С основу среды (см. Б.3.2.1.1)
добавляют, тщательно перемешивая, раствор селективной добавки (см. Б.3.2.1.2).
* 925 см3, если используют раствор амфотерицина В.
** В зависимости от плотности среды.
19