ГОСТ Р 52711—2007
зоаания стерильной одноразовой посуды ее стерилизацию не проводят. Передстерилизацией пипетки
со вставленными тампонами изватыи чашки Петри взакрытом видеукладывают в металлические пена
лы или обертывают крафт-бумагой, после чего стерилизуют. Бумага, используемая для обертывания
лабораторной посуды, не должна разрушаться при стерилизации. Режим стерилизации посуды по
ГОСТ 26668(1.2).
4.3.1.3 Стерильную посуду хранят в плотнозакрывающихся шкафах или ящиках с крышками.
4.3.1.4 Посуду с микробиологическими средами после проведения анализа обеззараживают
передмойкойпутем стерилизации вавтоклаве при температуре (121 ±2)X в течение 30 мин иликипяче
нием в точение 1ч.
4.3.2Приготовление реактивов и растворов
4.3.2.1 Приготовление водного раствора объемнойдолей перекиси водорода 3 %
Для приготовления водного раствора объемной долей перекиси водорода 3 % к 10 см3раствора
перекиси водорода объемной долей 30 % добавляют 90 см3дистиллированной воды. В случае, если
используют раствор перекиси водорода с другой объемнойдолей, проводят пересчет.
4.3.2.2 Приготовление водного раствора объемнойдолей этилового спирта 70 %
Для приготовления водного раствора объемной долей этилового спирта 70 % к 70 см396 %-ного
этилового спирта по ГОСТ Р 51652 добавляют 26 см3дистиллированной воды. Применяют для асепти
ческой обработкитары при отборе пробдля анализа.
4.3.2.3 Приготовление стерильной воды
Стерильнуюводуполучаютпутемфильтрациидехлорированнойпитьевой водычерезстерильный
мембранный фильтр диаметром пор 0.2 мкм или стерилизацией в течение 30 мин при температуре
(121 ± 2)°С.
4.3.2.4 Сроки хранения реактивов и растворов не должны превышать одного месяца. Водный
раствор перекиси водорода объемной долей 3 % необходимо хранить при температуре 0 °С—8 X в
склянке из темного стекла с притертой пробкой.
4.3.3Подготовка специальных микробиологических сред к проведению анализа
4.3.3.1 Среды Мо1 и No 2
Нераспечатанную бутылкуствердыми средами No1и No2 нагреваютнаводяной банедо перехода
микробиологическойсреды из твердогосостояния вжидкое. Температура воды в водяной бане недолж
на превышать 95 X . После того как среда расплавилась, ее медленно охлаждают до температуры 45
X —48 X . При охлаждении среды следует избегать перепадатемператур более 20 X .
Расплавленную среду можно хранить в жидком состоянии в водяной бане при температуре
45 X —48 X неболее 2 ч.
4.3.3.2 Среда No3
Для проведения анализа путем внесения пробы воды непосредственно в бутылку с концентратом
подготовка не требуется.
Для проведения анализа пробы методом мембранной фильтрации или анализа пробы, взятой
методом свобирования. в бутылку с концентратом доливают стерильную воду до горловины бутылки и
содержимое перемешивают, после чего среда готова к использованию.
4.3.3.3 Среда No5
Приготовление 1дм3готовойсреды No5:
В термостойкую емкость (колбу Эрленмейера)объемом 1,5дм3вносят 60 г компонента 1 и посте
пенно, перемешивая, добавляют 1дм3деминерализованной воды.
Полученный раствор нагревают на магнитной мешалке с подогревом дотемпературы 48Х—52 X
при непрерывном перемешивании.
При достижении температуры раствора (50 * 2) X , добавляя компонент 2. корректируют уровень
pH раствора до 4.3—4.4. При выполнении коррекции необходимо использовать pH-метрс автоматичес
койтермокомпенсацией.
После проведения коррекции pH раствор нагреваютдо температуры 85X —87 X и выдерживают
при этой температуре в течение 60 с. ВНИМАНИЕ! Температура раствора недолжна превышать87 X !
Соблюдая правила асептики, разливают готовую среду № 5 в чистые емкости (термостойкие
бутылки с термостойкими крышками) и укупоривают. Применяют емкости и завинчивающиеся крышки,
способные выдерживатьтемпературу не ниже 120 X .
Наполненные емкости переворачивают вверхдном или придают им горизонтальное положение с
целью обеспечения пастеризации крышки ивнутренней поверхности емкости над жидкостью.
Готовая микробиологическая среда No 5 имеет бледно-опаловый цвет и может иметь уплотнения
коллоидной структуры, что не влияет на результаты анализа.
6