ГОСТ Р 52711—2007
После чего пробирку помещаютв термостатдля инкубирования при температуре (37± 1)°С. Пред
варительный анализ результатов проводят через 24 ч. Окончательное подтверждение получают через
48 ч с момента начала инкубирования засеянной среды.
4.5.3 Обработка результатов
Обработку результатов проводят в соответствии с 4.5.1.2.
4.6 Определение дрожжей, плесневых грибов, молочнокислых и уксуснокислых бактерий
4.6.1 Проведение анализа с использованием микробиологической среды № 2
4.6.1.1 Методпрямого посева в чашки Петри
Метод основан на непосредственном внесении массы (объема) анализируемой пробы в чашки
Петри, инкубировании посевов иподсчете всехвыросших колоний.
Метод позволяет проводитьопределениедрожжей, плесневых грибов, молочнокислых и уксусно
кислыхбактерийванализируемой пробеконцентрированногосока, сахарногосиропа, купажногосиропа
с осветленным соком или с соком с мякотью и в пробах нефильтруемых готовых продуктов.
Анализ проводят вдвух повторностях.
Проведение анализа
Отобранную пробу или ее разведения, приготовленные по ГОСТ 26669, тщательно перемешива
ют. после чего стерильной пипеткой вносят в стерильную чашку Петри (при анализе пробы большого
объемаиспользуютнесколькочашекПетри). Затем васептическихусловияхзаливаютрасплавленнойи
охлажденной до температуры 45 °С—48 °С средой N
p
2. предварительно обработав фламбированием
края посуды, в которой она содержится.
Соотношение между массой (объемом) анализируемой пробы или ее разведениями и объемом
питательной среды 1:5.
Содержимоечашки Петри аккуратноперемешиваюткруговымидвижениями, избегаяобразования
пузырьков воздуха, попадания агара на края и крышку чашки.
После застывания агара чашки Петри помещают в термостат вверхдном и инкубируют при темпе
ратуре (28 i 2) "С в течение48 ч.
Обработка результатов
Через 48 ч инкубирования проводят учет типичных колоний визуально. При необходимости для
первичной идентификации колоний микроорганизмов проводят микроскопирование. Для этого из
отдельной колонии готовят препараты методом раздавленной капли. На предметное стекло наносят
каплю стерильной воды. Затем в эту каплю стерильной микробиологической петлей вносят часть коло
нии. размешивают ипокрывают покровным стеклом. Капля санализируемым материалом должна быть
такой, чтобы после прижиманияее покровным стеклом суспензия не выступала из-под стекла. В против
ном случае, избытоксуспензии удаляют кусочком фильтровальной бумаги. Микроскопирование препа
ратов проводятс объективами увеличением 20х,40’ или 100’.
Дрожжевые клетки — круглой, овальной или продолговатой формы, часто пачкующиеся, длиной
2,5—10 мкм.
Плесневые грибы состоят из нитей-гифов, без перегородок или септированных на клетки. Гифы
образуют боковые выросты и разветвления.
Характеристика колоний отдельных видов микроорганизмов:
дрожжи — матовые, желто-белесые или красные колонии. Частично наблюдается звездообраз
ный рост или образование белой пленки.
Плесневые грибы — образуют большой круглый мицелий с белым краем (обычно диаметром
более 0,5 см) с зеленой, коричневой или чернойсерединой.
Молочнокислые бактерии образуют мелкие блестящие, эллиптические колонии на поверхности и
внутри питательной среды. Запахслегкакислый, напоминает прогорклоемасло. Каталазоотрицательные.
Уксуснокислые бактерии — блестящие колонии со специфическим запахом уксусной кислоты.
Каталазоположительные.
При определении количества дрожжей и плесневых грибов, молочнокислых и уксуснокислых бак
терий все колонии (при необходимости подтвержденные микроскопированием) подсчитывают отдель
но. пользуясьлупой увеличением 4—10*.
Дляподсчета колонийвчашках, засеянныхразведениями анализируемой пробы, отбираютчашки,
на которых выросло от 15до 100 колоний.
Колонии каждоговида микроорганизмовподсчитываютв каждом изпараллельныхпосевовинахо
дят среднеарифметическое значение количества колоний каждого вида в соответствии С4.4.1.2.
Дифференцирование
уксуснокис
л
ых
и
молочнокислых бактерий
При необходимости проводят дифференцирование уксуснокислых и молочнокислых бактерий с
помощью каталазноготеста. Для проведения анализа капают водиночную колониюодну каплю водного
ю