ГОСТ Р 52711—2007
4.3.3.4 Хранение готовых микробиологических сред
Готовые микробиологические среды, разлитые в тару, хранятследующим образом:
СредыNo1.2.3 ираствор питательнойсреды No3 хранятпри температуре(4 ±2)°С неболееодного
месяца.
Среду No4 хранят всоответствии с инструкцией наупаковке.
Среду No5хранят втечение четырех недельсодня приготовления при температуре0 °С—8 °С.
Поистечении срока хранения микробиологическиесреды использованию не подлежат.
4.3.4 Подготовка мембранных фильтров и фильтровального прибора. Порядок работы с
применением метода мембранной фильтрации
4.3.4.1 Дляфильтрациииспользуютстерильныеинестерильныемембранныефильтры размером
пор 0,45 мкм.
Нестерильныефильтры стерилизуют непосредственно перед их использованием кипячением или
другим способом, рекомендованным фирмой-изготовителем.
Для кипячения фильтры помещают в стеклянный стакан или медицинский стерилизатор сдистил
лированной водой, нагретой до 30 °С. медленно доводят до кипения на слабом огне, после чего воду
меняют и кипятят 10 мин. Во избежание деформации фильтров во время кипячения в стакан или меди
цинскийстерилизатор помещаютстеклянные шарики.
4.3.4.2 Перед фильтрацией пробы воронку и столикобтирают ватным тампоном, смоченным вод
ным раствором объемнойдолей этилового спирта 70 % истерилизуютфламбированием. После охлаж
дения на столик фильтровального прибора кладут фламбированным пинцетом мембранный фильтр,
устанавливаютворонкуи закрепляютдержателем.
Использованиеодноразовыхстерильныхкомплектов, состоящихизворонкиимембраны, позволя
ет исключить стадию стерилизации фильтровального прибора.
4.3.4.3 Анализируемый объем пробы выливают в воронку и включают вакуум-насос. При отсут
ствии мерных уровней в воронке для внесения необходимого объема пробы используют стерильные
цилиндры или стерильные пипетки. При фильтровании 1 см3анализируемой пробы в воронку предва
рительно заливают не менее 10см3стерильной воды, после чего вносятанализируемую пробу.
4.3.4.4 По окончании фильтрации пробы фильтр промывают 10—20 см3стерильной воды. После
прохожденияжидкости через фильтр воронкудержат под вакуумом в течение 3—5 с (до полного удале
ния следов жидкости), послечего насос отключают.
Спомощьюклапана (или посредствомснятия шлангас вакуум-насоса)выравниваютдавление под
мембранойдо атмосферного, снимают воронкуи с помощьюфламбированного пинцетаосторожносни
мают фильтрс установки.
4.3.4.5 ОткрываютчашкуПетри с предварительно разлитой иохлажденной (застывшей)микроби
ологической средой и накладывают фильтр на микробиологическую среду так, чтобы между ним и
поверхностью питательной среды не оставались пузырьки воздуха. Для этого противоположный край
фильтра (напротив пинцета) долженлечь на поверхностьсреды, а затем постепенно накладывают весь
фильтр «накатом» насреду.
Поверхностьфильтрас осевшими на нее микроорганизмамидолжна быть обращена вверх. Чашку
закрывают и надне чашки под каждым фильтром делают надписи с указанием номера профильтрован
ной пробы. На однучашкуразрешается поместить взависимостиотдиаметра фильтра ичашки Петриот
одногодо четырехфильтров так. чтобы фильтры несоприкасались.
4.3.4.6 Перед фильтрацией следующей пробы столик и воронку прибора вакуумного фильтрова
ния тщательно фламбируют.
4.4Определение количества мозофильных аэробных и факультативно-анаэробных мик
роорганизмов (КМАФАнМ) с использованием агаризованной среды № 1
4.4.1 Метод прямого посева в чашки Петри
Методоснован на непосредственном внесении анализируемогообъема пробы воды; анализируе
мой массы (объема) концентрированного сока, сахарного сиропа, купажного сиропа, готового продукта
или ихразведения в агаризованную среду, инкубировании посевови подсчете всехвыросшихколоний и
позволяет определить количество мозофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорга
низмов (КМАФАнМ).
Анализ проводят в двух повторностях.
4.4.1.1 Проведение анализа
Отобранную пробу или ее разведение по ГОСТ 26669 тщательно перемешивают, после чего сте
рильной пипеткой вносят в стерильную чашку Петри (при анализе пробы большой массы (объема)
используют несколькочашекПетри). Затем в асептическихусловиях заливают расплавленной иохлаж-
7