ГОСТ 31209—2003
5.4.5
Определениеинде
к
сато
к
сичности на сперматозоидахбы
к
а
5.4.5.1 Все растворы в течение эксперимента должны находиться при постоянной температуре
(40 + 1,5)*С.
5.4.5.2 Для определения индекса токсичности опытного раствора необходимо сравнить его с конт
рольным (модельным) раствором. В качестве контрольного раствора выбирают глюкозо-цитратную среду
(глюкоза — 4 г, цитрат натрия 1г,дистиллированная вода 100 мл). Контрольная среда одновременно явля
ется разбавителем для оттаивания замороженной спермы. Опытным раствором является вытяжка из изде
лия. доведенная до изотонии глюкозой и цитратом (глюкоза — 4 г. цитрат 1г. вытяжка 100 мл). Контрольный и
опытный растворы по 1 мл помешают в пробирки с притертыми пробками и ставят в водяную баню при
температуре (40 ♦ 1.5) еС. Контрольный и опытный растворы приготавливают заранее, за час до начала
эксперимента.
5.4.5.3 Оттаивание замороженной спермы
Дозируют в пробирки по 0.25 или 0.5 мл разбавителя и ставят их в водяную баню при температуре
(40 +1.5) °С. Охлажденным до температуры жидкогоазота анатомическим пинцетом извлекают из сосуда
Дьюара гранулуспермы и быстро опускают внагретыйраствор. НЕДОПУСКАЕТСЯ ОТТАИВАТЬ НЕСКО
Л
ЬКО
ГРАНУ
Л
В ОДНОЙ ПРОБИРКЕ! Сразу после размораживания содержимое пробирок с целью приготовле
ния маточного раствора спермы сливают в пробирку и тщательно перемешивают.
5.4.5.4 Приготовление рабочих образцов
В каждую пробирку контрольной и опытной серий помещают по 0,2 мл маточного раствора спермы.
5.4.5.5 Подготовка пробы к исследованию
Каждый рабочий образец переносят в кювету. Кювету герметизируют, устанавливают в кюветодержа-
тель и помещают в стенд.
5.4.5.6 Накопление экспериментальныхданных
Нажатием кнопки «ПУСК» включают процесс накопления данных. При достижении нулевых значений
показателя подвижности во всех кюветах отжатием кнопки «ПУСК» производят остановку процесса накоп
ления данных.
5.4.57 Обработка экспериментальныхданных
Обработку экспериментальныхданных осуществляют с помощью компьютера. Для каждого образца
рассчитывают среднее время подвижности (.рв условных единицах
£(т, х /)
*<=р “
1 т ,
где
т,
— /-е значение показателя подвижности;
/ — текущий номер оценки показателя подвижности.
Для контрольной и опытной выборокобразцов вычисляют среднее арифметическое значение и сред
нее квадратическое отклонение, по которым в свою очередь рассчитываютдля каждой выборки коэффици
ент вариации С по формуле
С *
f x
100%,
где
a
— среднее квадратическое отклонение;
х
— среднее арифметическое отклонение.
В случае получения значения коэффициента вариации более 15 % хотя бы для одной из выборок,
эксперимент повторяют. Если значение коэффициента вариациидля каждой из выборок меньше или равно
15 %. результаты считаются статистически верными.
Затем рассчитывают индекстоксичности
1Г
по формуле
где Г£. Г‘р — среднее арифметическое значений среднего времени подвижности для опытной и конт
рольной выборок образцов соответственно.
5.4.5.8 Оценка результатов контроля
Испытуемую партию изделий считают нетоксичной, если индекс токсичности в пределах
70 % — 120 %. Во всех остальных случаях партию изделий считают токсичной.
14