ГОСТ 31209—2003
Для получения индекса раздражения для одного животного надо сложить баллы раздражения как по
эритеме, так и по отекудля всех сроков обследования и разделить на число обследований. Общий индекс
раздражения сравнивают с приведенным в таблице 9.
Т а б л и ц а 9 — Оценка кожно-раздражающего действия
Кожная реакцияСредний балл
Не принимается но внимание
Слабая реакция
Средняя реакция
Сильная реакция
0—0.4
0.5—1.9
2—4.9
5—8
Изучение раздражающегодействия на слизистую глаза проводят на 3 кроликах, которым в один глаз
вносят вытяжку ежедневно в течение 5дней с помощью пипетки по 1—2 капли. Состояние глаз контролиру ют
через 1 и 24 ч, перед следующим воздействием.
Реакцию учитывают в соответствии со шкалой, приведенной втаблице 10.
Т а б л и ц а 10— Оценка раздражающего действия на слизистую глаза
Реакция слюистой оболочкиОценка в баллах
Реакции нет0
Л
егкое покраснение коньюнктивы1
Покраснение коньюнктивы и частично склеры2
Резкое покраснение коньюнктивы и всей склеры, гнойный офтальмит3
Результаты обследования каждого из 3 кроликов суммируют и делят на число обследований. Общий
индекс раздражения определяют по таблице 10.
5.4.3
Определение сенсибилизирующегодействияна белых
к
рысах
Определение сенсибилизирующего действия проводят на белых крысах. В каждой группе должно
быть не менее 8 животных. Сенсибилизируют животных при введении 0.02 мл вытяжки из контейнеров в
кожу наружной поверхности уха. Контрольным животным вводят контрольный раствор— дистиллирован
ную воду. Через 10 дней проводят 5—7 ежедневных эпикутанных аппликаций вытяжки, нанося на кожу
выстриженного бока по 0.5 мл вытяжки. На следующийдень после последней аппликации проводят прово
кационную внутрикожную пробу. Для этого 0.02 мл вытяжки инъецируют в кожу другого выстриженного
бока животного. Реакцию на провокационную внутрикожную пробу отмечают через 15 мин, 24 и 48 ч. отме
чая интенсивность покраснения и площадь гилеремированного участка. Через 48 ч после введения внутри-
кожной пробы животных забивают декапитацией, отбирая кровьдля проведения специфических иммуноло
гических реакций. Используют иммунологические тесты, основанные на определении образования комп
лекса антиген-антитело: реакциюдегрануляции тучных клеток (РДТК). реакцию пассивной гемагглютинации
(РПГА), реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию специфической агломерации лейкоцитов (РСА
Л
).
реакцию специфического лизиса лейкоцитов (PCCJI). До начала проведения иммунологических специфи
ческих реакций необходимо тщательно подобрать рабочую концентрацию вытяжки, не вызывающую дена
турации сывороточных белков и не оказывающую цитотоксического действия.
У забитых животных определяют коэффициенты массы иммунокомпетентных органов— селезенки и
тимуса и обрабатывают полученный материал статистически сопределением коэффициента «Ь>Стьюдента.
При оценке сенсибилизирующего эффекта учитывают результаты внутрикожной пробы, определения
коэффициентов массы внутренних органов и иммунологических тестов с кровью животных.
5.4.4
Определениегемолитичес
к
ой а
к
тивности
5.4.4.1 Принцип метода — определение гемолитического действия вытяжки по 100%-ному гемолизу.
5.4.4.2 Вытяжки готовятся всоответствии с 4.1.
5.4.4.3 Приготовление 10%-ной взвеси эритроцитов
Для приготовления взвеси эритроцитов может быть использована эритроцитная масса или цитратная
кровь, заготовленная на 3.9%-ном растворе цитрата натрия в соотношении 1:9. Срок хранения цитратной
12