ГОСТ ISO 10993-6—2011
При окончании каждого исследования число образцов, необходимыхдля дальнейших исследова
ний. должно соответствовать требованиям приложений В. С и D. Образцы для анализа должны быть
получены, по крайней мере, от трехживотных.
5.5.2 Макроскопическое исследование
Исследуют возможные изменения нормальной структуры ткани каждого участка имплантации с
помощью оптической линзы. Оценивают также состояние региональных лимфатических узлов Tilney
[32]. Регистрируют вид и степень проявления обнаруженных реакций ткани, такие как гематомы, отеки,
образование рубцов и (или)другие выраженныеотклонения. Отмечают наличие, форму илокализацию
имплантата, включая возможныеостаткидеградируемого материала. Длядокументированиянеобходи
мо фотографировать места имплантации.
В дополнение к осмотруучастков имплантации следуетобратитьвнимание насостояниездоровья
животного или его реакцию на имплантат, для полного анализа проводят вскрытие трупа.
5.5.3 Извлечение имплантата и подготовка образцов тканей
После гуманной эвтаназии животного вырезают имплантат вместе с достаточным количеством
окружающейеготкани для оценкиместнойтканевойреакции. Еслиимплантируемыйобразецневозмож
но обнаружить (деградируемый/резорбируемый материал), то образец нормальной ткани вырезают
вокруг отмеченного места имплантации на расстоянии нескольких миллиметров. При исследовании
биостабильных имплантатов необходимо осуществить забор лимфатическихузлов, служащих индика
торами патологических процессов. При исследовании биодеградируемых имплантатов также необхо
дим заборлимфатическихузловдлявозможногообнаруженияв нихпродуктовдеструкцииматериалов.
П р и м е ч а н и е — Необходимо заметить, что у некоторых видов животных не всегда удается обнаружить
лимфатические узлы.
При обнаруженииотклонений в здоровье животного, выраженных патологическихпроцессов илив
случае, если протоколом эксперимента предусмотренаоценка системнойтоксичности, возможен забор
других внутреннихорганов.
Для проведения гистологических исследований вырезанные участки ткани обрабатывают по при
нятой стандартной схеме: фиксация, размельчение, приготовление блоков, изготовление срезов и их
окраска. Вотчет записываютрасположение имплантата, числосрезов и ихформу.
При использовании традиционных методик выделенный образец ткани с имплантатом вскрывают
до или после обработки консервантом и регистрируют в отчете состояние поверхности имплантата и
окружающихего тканей. Необходимо соблюдать особую осторожность, чтобы не повредить ткани, при
лежащие к поверхности имплантата.
При исследовании поверхности раздела имплантата иткани предпочтительно применятьтвердый
пластикдля формирования блоков образца ткани с имплантатом in situ. Для приготовления гистологи
ческих срезов используют соответствующие методики.
Необходимопродемонстрировать, чтометодика подготовки блоковс использованием пластика не
вызывает значительныхизменений структуры ткани, прилегающей к поверхности имплантата.
П р и м е ч а н и е — Для «мягких» имплантатов в мягких тканях подготовку образцов для гистологического
анализа следует проводить без удаления имплантата.
5.5.4 Микроскопические исследования
Система баллов, применяемаядля оценки гистологическихисследований, должна учитыватьсте
пень местной реакции ткани по области ее распространения либо количественно (например, в микро
метрах), либо полуколичественно (см. приложение Е). Регистрируют ориентацию имплантата в срезе,
число срезов и геометрию среза.
Оценивают и регистрируют следующие параметры биологической реакции:
- степень фиброэа/толщину фибрознойкапсулы (в микрометрах) ивоспаления:
- дегенерацию, определяемую изменениями в морфологии ткани;
- число ираспределениеклеток, характеризующих воспалительный процесс всрезахткани, таких
как полиморфоядерные нейтрофилы, лимфоциты, плазматические клетки, эозинофилы. макрофаги и
многоядерные клетки, в зависимостиот расстояния от границы раздела имплантат/ткань;
- наличие, степень итип некроза ткани;
- другие параметры, характеризующие измененияткани, например, наличие процесса васкуляри
зации. образование жирового инфильтрата, гранулем и костной ткани;
- параметры материала, такие как наличие фрагментов и (или) осколков, форма и локализация
остатковдеградируемого материала;
- качество иколичество вросшей тканидля пористыхи биодеградируемых материалов.
6