ГОСТ Р 52815— 2007
5.1.4 Раствор сульфаметазина (сульфамезатина, сульфадимидина)
Раствор используют только в случав подозрения присутствия в испытуемом продукте бактерий рода
Proteus или при испытании сильно обсемененных продуктов, например, из сырого мяса.
5.1.4.1 Состав:
сульфаметазин..............................................................................................0.2 г;
раствор гидроксида натрия,
с
(NaOH) = 0.1 м о л ь/л ..........................10 см3;
вод а.................................................................................................................90 см3.
5.1.4.2 Приготовление
Растворяют сульфаметазин в растворе гвдроксида натрия. Доводят объем водой до 100 см3. Стери
лизуют путем фильтрации через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм. Приготовленный раствор
допускается хранить не более 1мес при температуре (3 ± 2) вС.
5.1.5 Готовая питательная среда
5.1.5.1 Состав:
основа среды (см. 5.1 .1 )............................................................................100 см3.
раствор теллурита калия (см. 5.1.2).....................................................1,0 см3;
эмульсия яичного желтка (см. 5.1.3)......................................................5,0 см3;
раствор сульфаметазина (см. 5.1.4) (если необходимо)................2,5 см3.
5.1.5.2 Приготовление
Расплавляют основу, затем охлаждают до температуры примерно 47 °С на водяной бане. В асепти
ческих условияхдобавляютдва других раствора и. если необходимо, раствор сульфаметазина (см. 5.1.4).
Предварительно каждый раствор подогревают на водяной бане при 47 °С. тщательно перемешивая среду
после каждого прибавления раствора.
5.1.6 Приготовление чашек Петри с агаризованной средой Байрд-Паркера
Разливаютсоответствующее количество готовой среды (см. 5.1.5) в стерильные чашки Петри, чтобы
получить агаровый слой толщиной примерно 4 мм, и дают застыть. Приготовленные чашки можно хранить
до использования 24 ч при температуре (3 ♦ 2)
°С.
Перед применением среду в чашках подсушивают в сушильном шкафу при температуре от 25 вС до
50 СС до тех пор. пока с поверхности среды не исчезнут капельки влаги. Предпочтительней подсушивать
среду при снятых крышках и поверхностью среды вниз.
5.2 Бульон на основе вытяжки из сердца и мозга
5.2.1 Состав:
продукт ферментативного гидролиза животных тканей......................10,0 г,
дегидратированная вытяжка мозга теленка.........................................12,5 г,
дегидратированная вытяжка сердца теленка........................................5,0 г,
глю коза.............................................................................................................2,0 г;
хлорид натрия.................................................................................................5,0 г;
двуэамещенный фосфорнокислый натрий, безводный (Na2HP04) . . 2,5 г,
в о д а .................................................................................................................. 1000 см3.
5.2.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде.
Устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял при температуре 25
°С
(7.4 ± 0.2).
Разливают питательную среду по 5—10 см3в пробирки. Стерилизуют среду в течение 15 мин при
температуре (121 ± 1)°С.
5.3
Плазма крови кролика
5.3.1Сввжеполучвннуюв асептических условиях из сердца кролика кровь тщательно смеши
вают в соотношении 4:1 со стерильным раствором лимоннокислого натрия (цитрата натрия).
Полученную смесь центрифугируют в течение 15минпри 3000об/мин илиотстаивают нахолодепри
температуре (3 ± 2) °С. затем плазмуотсасывают пипеткой и разводят ее израсчета 1см3плазмы
на 4 см3физиологического раствора. Разведенную плазму по 0.5 см3разливают в стерильные
пробирки.
Если в качестве антикоагулянта плазмы использовались цитраты калия или натрия, то к плазме
добавляют раствор ЭДТА (этилендиамиитетрауксусная кислота) до концентрации ЭДТА в плазме 0.1 %.
В плазму, содержащую оксалат или гепарин ЭДТА. не добавляется.
1615