ГОСТ Р 52815— 2007
8.3.5 После инкубирования в течение (24 ± 2) ч чашки Петри с посевами просматривают и отмечают
на обратной стороне чашки положение типичных и атипичныхдля коагулазололожительных стафилококков
колоний.
Характеристика типичных и атипичных колоний — по 8.1.4.
8.3.6 Все чашки Петри с посевами по 8.3.5 продолжают инкубировать при температуре (37 ± 1) °С в
течение еще (24 ± 2) ч. после чего отмечают появление новых типичных и атипичных колоний.
Для подсчета берут чашки Петри, на которых выросло максимум 300 колоний, по 150 типичных и/или
атипичных колоний для двух последовательных разведений. В посевах на чашках Петри не должно быть
менее 15 колоний. Выбирают для подтверждения на каждой чашке Петри пять типичных колоний, если
присутствуют только типичные колонии, и пять атипичных колоний, если присутствуют только атипичные
колонии, или пять типичных колоний и пять атипичных, если присутствуют оба типа колоний. Если на чаш ках
Петри, засеянных неразбавленным жидким продуктом или самым меньшим разведением других про дуктов.
имеется менее 15 типичных и (или) атипичных колоний, то отбирают все параллельные чашки Пет ри, на
которых имеются типичные или атипичные колонии. Отбирают колониидля подтверждения вколиче ствах.
указанных выше.
8.3.7 Каждую отобранную колонию отдельно пересевают по 8.1.5. Посевы инкубируют при температу
ре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3)ч.
8.3.8 Если 1 см3посевного материала распределили по трем чашкам по 8.3.2, то принимают эти
чашки Петри за одну при всех последующих подсчетах и процедурах подтверждения.
8.4Метод определения количества коагулазоположительных стафилококков посевом в
агаризованную среду
8.4.1 В каждую из двух чашек Петри вносят с помощью стерильной пипетки 1 см3 продукта, если
продукт жидкий или 1 см3исходной суспензии в случае продуктов другой консистенции.
В две другие стерильные чашки Петри вносят по 1 см3исходной суспензии жидкого исследуемого
продукта или первого десятикратного разведения в случае продуктов другой консистенции.
Повторяют эту процедуру для последующих разведений, используя для каждого разведения новую
стерильную пипетку.
Посевы заливают Байрд-Паркер агаром с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном
илиоднойиз
агаризованных сред, указанных в 8.1.1.
слоем приблизительно 3—4 мм.
Осторожно перемешивают инокулят со средой и для застывания оставляютчашки Потри в спокойном
состоянии на холодной горизонтальной поверхности.
8.4.2 Чашки Петри с посевами после застывания среды переворачивают и помещают в термостат при
температуре (37 ± 1) °С на 18—24 ч. Если необходимо, продолжают инкубирование еще 18—24 ч.
8.4.3 После инкубирования подсчитывают типичные и атипичныедля коагулазоположительных стафи
лококков колонии в соответствии с 8.1.5.
Для подтверждения принадлежности выросших типичных и (или) атипичных колоний к коагулазо-
положительным стафилококкам отбирают колонии в соответствии с 8.3.6.
8.4.4 Каждую отобранную колонию отдельно пересевают по 8.1.5.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч.
8.4.5Допускается также выявление коагулазоположительных стафилококков проводить посе
вом в или на агаризованную среду при условии, что навескупродукта, в которойпредусматривается
выявление, возможно посеять по эгпомуметоду.
При выявлении коагулазоположительных стафилококков посевом в или на агаризованную среду
подсчетаколичества колонийнепроводят.
9 Подтверждение принадлежности выявленных микроорганизмов
к коагулазоположительным стафилококкам
Для подтверждения принадлежности к коагулазоположительным стафилококкам у выросших микро
организмов и отобранных по 8.1.5,8.2.3.8.3.7 и 8.4.4 определяют
отношениек окраскепо Граму.
способ
ность коагулировать плазму крови кролика
и способностьобразовывать катапазу.
9.1 Окраска по Граму
Из культурготовят мазки, окрашивают их по Гоамупо ГОСТ30425и микроскопируют.
16913