ГОСТ Р 52815—2007
Перед посевом анаэробные условия в среде создают кипячением при (100 ± 1) °С в течение 15 мин,
наслоенном агара или парафина в каждую пробирку после посева, а также с помощью альтернативной
процедуры — инкубирования пробирок в емкости или инкубаторе в анаэробных условиях.
4.1.1.2 Пробирки с посевами инкубируют при температуре 37 °С втечение 24—48 ч. Предположитель
ное присутствие коагулазоположительныхстафилококков наЖиолитти-Кантони бульонеопределяется по
редукции теллурита калия, а
наглюхозномили соловомбульоне— по помутнениюсреды.
4.1.1.3 Поверхность одной из агариэованных селективно-диагностических сред (Байрд-Паркер
агара,
молочно-солевого агара, яично-желточно-азидного агара, яично-желточно-солевого агара,
агара с
кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном) инокупируют из предположительно положительных проби рок
(см. 4.1.1.3) после 24 ч и все оставшиеся пробирки после 48 ч.
4.1.1.4 Чашки Петри с посевами инкубируют при температуре 37 °С в течение 24— 48 ч.
Предположительное присутствие коагулазоположительных стафилококков определяется по редукции
теллурита калия и яично-желточной реакции (лецитиназной активности).
На агаре с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном после инкубирования присутствие коагулазо-
положительных стафилококков определяется по типичным колониям, показавшим специфичную реакцию
(бычий фибриноген/кроличья плазма).
4.1.1.5 Подтверждение принадлежности типичных и (или) атипичных колоний к коагулазололожитель-
ным стафилококкам проводят по изучению
отношения выявленныхмикроорганизмовкокрасхепо Граму.
определениюприсутствияу ниххаталазыи коагулазы.
Подтверждение принадлежности коагулазоположительных стафилокоххов х S. aureus прово
дят по определению образования ацетоина. определению ферментациив аэробныхусловияхмаль
тозы и. при необходимости, определению термостабильной нуклвазы и гемолитической актив
ности.
4.1.1.6 Результаты выявления коагулазоположительных стафилококков
и S. aureus
выражают: «обна
ружены» или «не обнаружены» в хсм3или
х
граммах продукта.
4.1.2Метод НВЧ — определение количества коагулазоположительных стафилококков
и S.aureus
4.1.2.1 Навески продукта и (или) серию разведений навески продукта вносят вжидкую селективную
питательнуюсреду.
Инкубированиепосевови подтверждениеприсутствия вних коагулазоположитель
ных стафилококков и S. aureus проводят по 4.1.
1.3—
4.1.1.6.
4.1.2.2 Наиболее вероятное число коагулазоположительных стафилококков
и S. aureus
в 1см3или
в 1 г продукта определяютдля подтвержденных посевов, пользуясь НВЧ-таблицей
по ГОСТ26670.
4.2Методы определения количества коагулазоположительных стафилококков
и S. aureus
посевом на (в) агаризованные селективно-диагностические среды
Сущность методов
Методы определения количества коагулазоположительных стафилококков
и S. aureus
посевом на (в)
агаризованные селективно-диагностические среды основаны на высеве навески продукта и/или разведе
ния навески продукта на (в) агаризованную селективно-диагностическую среду, инкубировании посевов,
подсчете типичных и (или) атипичных колоний, подтверждении по биохимическим признакам принадлежно
сти выделенных колоний к коагулазоположительным стафилококкам
и S. aureus.
4.2.1 Проводят посев определенного количества жидкого продукта или определенное количество ис
ходной суспензии при использовании продукта другой консистенции на или в агаризованную селективно-
диагностическую питательную среду на две параллельные чашки Петри.
Аналогично проводят посев десятикратных разведений испытуемого продукта.
4.2.2 Посевы в чашках Петри инкубируют при температуре 37 °С в течение 24— 48 ч.
4.2.3 Количество коагулазоположительных стафилококков в 1 см3или 1 г продукта определяют по
числутипичных и/или атипичных колоний, выросших начашках Петри, принадлежность которых к коагула
зоположительным стафилококкам подтверждена путем определения
отношения микроорганизмовиз этих
колонийх окраскепо Граму. наличияу них каталазы
и коагулазы.
При посеве в или на агаризованную среду с кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном определяют
только типичные колонии и без подтверждения по биохимическим признакам их относят к коагулазоположи
тельным стафилококкам.
Количество S. aureus в 1см3 или 1 г продукта определяют исходя из количества хоагулазо-
положитвльных стафилокоххов. принадлежность которых к S. aureus подтверждена по образоеа-
159
3