ГОСТ Р 52815— 2007
тонном или сердечно-мозговом бульоне, и использовать ее для постановки реакции ллазмокоагуляции
спустя 2 ч после появления видимых признаков роста микроорганизмов. При постановке реакции плазмо-
коагуляции к 0.5 см3 разведенной плазмы добавляют две капли бульонной культуры. Учет результатов
коагуляции плазмы вданном случае проводят в сроки от 30 мин до 2—4 ч. Оценка степени коагулирования
плазмы — по 9.3.3.
9.4 Оценка результатов подтверждения принадлежности характерных колоний к коагула-
зоположительным стафилококкам
Если при испытании типичных и атипичных колоний в них обнаружены
грамположительныв конки,
образующиекаталазу,
способные коагулировать плазму крови, то считают, что выявленные микроорганиз
мы относятся к коагулазоположительным стафилококкам.
9.5 Подтверждение принадлежности выявленных коагулазоположитольных стафило
кокков к S. aureus
Принадлежность выявленныхкоагулазоположительных стафилококковк
S.
aureusпроводят по
определению их способности образовывать ацвтоин и ферментировать мальпюзу в аэробных
условиях.
Дифференциация коагулазоположительных видов и подвидов стафилококков по двум призна
кам — образованию ацвтоина и ферментации мальтозы в аэробных условиях приведена в прило
женииА.
9.5.10пределение образования ацвтоина (реакция Фогес-Проскауера)
Культуру высевают в пробирки со средой Кларка. Посевы инкубируют при температуре
(37±1)°С в течение 48 ч.
После инкубирования посевов к 1 см3 отобранной культуральной жидкости прибавляют 0.6 см3
раствора (х-нафтола. приготовленногопо 5.12. и 0.2ал2растворагидроокисикалия, приготовленного
по 5.20.
После прибавления каждогореактива пробиркувстряхивают. Появлениерозового окрашивания
через 15—60мин указываетнаположительнуюреакцию.
S. aureus образует ацвтоин.
9.5.2 Определение ферментации мальтозы в аэробных условиях
Способность ферментации мальтозываэробных условиях определяютсцельюдифференциа
ции S. aureus от других коагулазоположительных видов
S.
intermedius и S. hyicus subsp hyicus.
Для определения ферментациимальтозыв аэробных условияхкультуры, подлежащиеисследова
нию. высевают уколом петлейв среду Гисса с мальтозой.
Посевы инкубируют при температуре (37 ±1)’Св течение 48 ч.
При ферментации мальтозы в аэробных условиях с образованием кислоты цвет среды Гисса
изгхвнястся.
S. aureus ферментируетмальтозув аэробныхусловиях.
9.6 Определение способности S. aureus образовывать тврмостабильную нуклвазу и нали
чия у него гемолитической активности
Способность S.aureusобразовывать термостабильнуюнуклеазуи наличиеу негогемолитичес
койактивности устанавливаютпринеобходимости для определения егопотенциальнойэнтеротокси-
гвнностипо эпидпоказаниям.
9.6.1 Определение термостабильной нуклеазы
Для определения термостабильнойнуклеазы в среде (см. 5.11). разлитой по стерильным чашкам
Петри, вырезают с соблюдением правил асептики колодцы диаметром не более 4 мм. расстояние
между которыми должно быть не менее 7
—8
мм. Культуры, выросшие на мясопвптонном бульоне
послеинкубированияпритемпературе(37±1) ССв течение 24 ч, прогревают
в
кипящейводяной бане в
течение 15мин. охлаждают докомнатнойтемпературы и вносят вприготовленные в средеколодцы
пастеровскойпипеткойпо 1—2 капли. ЗасеянныечашкиПетрипомещаютв термостатпритемпера
туре (37 ± 1) °С. результаты учитывают через 1. 2 и 5ч. При наличии термостабильной нуклеазы
появляетсяярко-розовая зона вокруг колодца на синем фоно среды.
9.6.2 Определение гемолитической активности
Культуру высевают на поверхность кровяного агара. Посевы инкубируют притемпературе
(37 ±1) °Св течение 24 ч. После инкубирования посевов чашки Петри просматривают в проходящем
свете, отмечая наличие зонгемолиза.
17115