ГОСТ Р 52815— 2007
Коагулазоположитвлы<ые стафилококкиположительноокрашиваются по Гоаму. имеютшарооб
разнуюформу, клетки диаметром0.6— 1.0мкм. располагающиеся чаще (но не всегда) в виде скоплений,
напоминающих гроздьявинограда.
9.2 Определение каталазы
Способность выросших микроорганизмов образовывать каталазу определяют по ГОСТ 30425.
Коагупазоположитвльные стафилококкиобразуют каталазу.
9.3 Определение способности коагулировать плазму крови кролика
9.3.1 Способность коагулировать плазмукровикроликаопределяютумикроорганизмов, окраши
вающихсяположительнои образующих каталазу.
9.3.2 На Байрд-Паркер агарес кроличьей плазмой и бычьим фибриногеном подсчитывают количество
типичных колоний с зоной преципитации, указывающей на коагулазнуюактивность, и эти колонии без даль
нейшего подтверждения считают относящимися к коагулазоположительным стафилококкам.
9.3.3 Соблюдая правила асептики, в стерильные пробирки подходящего размера (например.
10 х 75 мм) добавляют 0.1 см3каждой культуры, выросшей на среде (см. 5.2) по 8.1.5.8.2.3. 8.3.7 и 8.4.4,
и 0.3 см3плазмы кролика (если изготовителем кроличьей плазмы не установлены другие количества)
и инкубируют при температуре 37 9С.
Опрокидывая пробирку, исследуют плазму на свертывание после 4—6 ч инкубирования и. если тест
отрицательный, просматривают через 24 ч инкубирования или исследуют после инкубационного периода
продолжительностью, установленной изготовителем кроличьей плазмы.
Тест на коагулазу считают положительным, если культура показала, по крайней мере. 3+ — оценку
коагулазной реакции, отмеченной на рисунке 1. Реакция на 1+ или 2♦ оценивают как промежуточную.
Для контроля качества каждой партии плазмы добавляют 0.1 см3 стерильного бульона на основе
вытяжки из сердца и мозга к рекомендуемому количеству плазмы кролика и инкубируют без посева культу ры
микроорганизмов при температуре 37 °С, при этом в контролируемой плазме не должно быть признаков
свертывания.
1
+
2+3+
4+
О ’*•»«/
\г _ 5 /
llg j
Ж
— отрицательная оценка: не отмечено образования фибрина:
1+ положительная оценка: небольшие ««сформировавшиеся комочки:
2*
положительная сценка: небольшой сформировавшийся комок:
3* положительная оценка большой сформировавшийся комок:
4+ все содержимое пробирки коагулировано и не меняет своего положения
при переворачивании пробирки.
Рисунок 1 — Результаты коагулазного теста
9.3.4 Допускается к плазме крови кролика, приготовленной и разлитой по пробиркам, добавлять по
одной петле испытуемых культур с агаризованных сред, оставляя одну пробирку с разведенной плазмой в
качестве контроля незасеянной.
Внесенную культуру тщательно размешивают и помещают в термостат при температуре (37 ± 1) гС.
Если через 6 ч коагуляции плазмы не произошло, то пробирки оставляют при температуре (30 ± 1) °С
на 24 ч. Еспи и через 24 ч плазма не скоагулировала. то испытуемую культуру стафилококка относят
ккоагулазоотрицательной. Оценка степени коагулирования плазмы — по 9.3.3.
9.3.5 С целью ускорения выявления коагулазоположительных стафилококков вместо суточных куль
тур. выросших на агаризованных средах, допускается испопьзовать культуру, выращенную на мясопеп-
14170