ГОСТ
Р 52723— 2007
или генома сои:
F 5’ GTGCTACTGACCAGCAAGGCAAACTCAGCA3’
R5’ GAGGGTTTTGGGGTGCCGTTTTCGTCAAC 3’.
или генома картофеля:
F
5’
GATGGTGCTGTTGCTACTGTTGATGATCC 3’
R
S
AACATCCATCGTGCAGTACCCCATTTAGC 3’.
или генома кукурузы:
F
51
TTCTCGTCGTGTGCCTGGCTCTGTСAG
У
R 5’ CGTССАТCATССТСАТСТGCTGCTGCTGGC 3’.
Контрольный образец (К+). содержащийДНК выявляемого вида животного (крупного рогатого скота,
свиньи, курицы) или растения (сои, кукурузы, картофеля).
4.34.4 Наборы реагентов для ПЦР в реальном времени,):
Пробирки амплификационмые слиофильно высушенной амплификационной смесьюсостава по 4.34.3
для проведения ПЦР в режиме реального времени.
ПЦР-растворитель, содержащий фоновый краситель ROX.
Смесь праймеров (олигонуклеотидов)для амплификации определяемых нуклеотидных последова
тельностей генома крупного рогатого скота:
F 5’GCCTTCTСТАТССТААТТCTTGCTСТААТС 3’
R 5’AATAGGTCTGCTACTAGGGCTСAGAATА 3’
или генома свиньи:
F 5’GGCTTTTCCGTCGACAAAGC 3’
R
S
CTGCGAGGGCGGTAATGAT 3’.
Контрольный образец (далее — К+). содержащий ДНК выявляемого вида животного (крупного рогато
го скота, свиньи).
4.35 Набор реагентовдля детекции продуктов амплификации методом электрофореза вагарозном
геле:
Буфер для электрофореза (трис-ЭДТА-боратный буфер, сухая смесь).
Агарозадля электрофореза.
Бромистый этидий. х.ч.
5 Отбор проб, их транспортирование и хранение, подготовка к анализу
Метод определения сырьевого состава основан на выявлении при помощи ПЦР фрагментов видос
пецифичнойДНК, присутствие которых в анализируемом материале однозначно свидетельствует о нали
чии в нем компонентов тканей растений или животных определенного вида.
5.1
Отбор проб
Отбор проб проводят по национальным стандартам, устанавливающим порядок отбора проб для
однородных групп пищевой продукции и кормов — ГОСТ 7631. ГОСТ 9792, ГОСТ 10852. ГОСТ 12430.
ГОСТ 13341. ГОСТ 26312.1. ГОСТ 26313. ГОСТ 27668.
Если масса (объем) продукта не установлена внормативных или технических документах на продукт
конкретного вида, то от каждой упаковочной единицы, лопавшей в выборку, отбирают:
- не менее 1 шт. — от продукции в потребительской таре в количестве по 5.3.1,5.3.2,5.3.3;
- от 50 до 1000 г (см3)— от продукции в транспортной таре (кусковой, жидкой, пастообразной, сыпу
чей и смешанной консистенции).
Для исследования пищевых продуктов животного, растительного происхождения, кормов и продо
вольственного сырья методом ПЦР отбор образцов для исследования проводят таким образом, чтобы не
происходила перекрестная контаминация (загрязнение одного образца другим).
Для этого отбор проб проводят в перчатках, а инструменты, применяемые для отбора и измельчения
материала, используют однократно или обрабатывают моющими средствами и стерилизуют в пламени
спиртовки или газовой горелки при переходе от пробы к пробе. Отбор проб проводят в чистую стеклянную
или пластиковую посуду или одноразовые пластиковые пакеты.
5.2
Транспортирование и хранение
Каждую отобранную пробу маркируютэтикетками суказанием наименования продукта, предприятия-
изготовителя. номера партии, даты отбора проб, цели исследования, подписей лиц, отбиравших пробу.
1>Применяют при проведении этапа амплификации по методике, описанной в подразделе 7.4.
223
5