ГОСТ Р 52723—2007
Отобранные пробы, предназначенныедля исследования вне предприятия-изготовителя, пломбируют
и опечатывают печатью организации, отвечающей за контролируемую продукцию, и транспортируют вла
бораторию.
Транспортирование образцов осуществляют при температуре, рекомендованной для их хранения.
Длительность транспортирования не должна превышать срока годности исследуемого материала.
Образцы исследуемого материала хранят в течение 1 мес (при необходимости повторного анализа)
согласно условиям, указанным производителем.
5.3 Подготовка проб к анализу (первичная обработка)
Подготовку проб проводят в условиях ПЦР-лаборатории в зоне первичной обработки материала в
соответствии с приложением А (см. А.1).
5.3.1 При исследовании жидких и полужидких материалов (молочных продуктов, соусов, паст, майо
незов и пр.) содержимое каждой из доставленныхупаковок тщательно перемешивают при помощи однора
зового шпателя. Затем отбирают по 1000 мкл содержимого, переносят в одноразовую пластиковую пробир ку
вместимостью 15 см3и тщательно перемешивают, формируя объединенную пробу. В одноразовую мик
ропробирку вместимостью 1.5 см3отбирают 1см3объединенной пробы, таким образом создавая среднюю
пробу, которую маркируют. С целью получения лабораторной пробы при помощи автоматическогодозатора
отбирают 100—150 мкл материала от средней пробы и помещают его водноразовую микропробирку вмес
тимостью 1.5 см3, маркируют и используют для выделения ДНК.
5.3.2 При исследовании сухих сыпучих материалов (комбикормов, мясо-костной муки, рыбной муки,
сухих кормов для домашних, промысловых и сельскохозяйственных животных, яичного порошка, муки,
белкового изолята, пищевых белковыхдобавоки пр.)от доставленной пробы отбирают не менее 10 наве сок
(по 5— 10 г каждая) в одноразовый полиэтиленовый пакет размером 20x30 см и перемешивают при
помощи одноразового шпателя, формируя объединенную пробу (50— 100 г). Затем водноразовую, герме
тично закрывающуюся пробирку или контейнер отбирают около 10 г объединенной пробы, создавая сред
нюю пробу, которую маркируют. Если полученная средняя проба не является гомогенной, то перед нача лом
исследования ее помещают в фарфоровую ступку и растирают фарфоровым пестиком до однородного
мелкодисперсного, гомогенного состояния. С целью получения лабораторной пробы для выделения ДНК
при помощи одноразового шпателя отбирают от гомогенной средней пробы 75 — 100 мкл материала по
насыпному объему, помещают его
в
одноразовую микропробирку вместимостью 1.5 см3, маркируют и
используют для выделения ДНК.
5.3.3 При исследовании материалов плотной консистенции (мяса в блоках, мяса механической дооб-валки.
фаршевых изделий, консервов и консервированных кормов, колбасы, сыра, соевого шрота, фураж ной
кукурузы и лр.) от поступившего на исследование образца (потребительской упаковки) отбирают не
менее 10 навесок (по 5 — 10 г каждая) и измельчают в фарфоровой ступке. Измельченный материал поме
щают водноразовый полиэтиленовый пакет размером 20x 30 см. перемешивают при помощи одноразово
го шпателя, формируя объединенную пробу (50 — 100 г). Затем водноразовую, герметично закрывающу
юся пробирку или контейнер отбирают около 10 г объединенной пробы,формируя среднюю пробу, которую
маркируют. Перед началом исследования пробу измельчают при помощи схальпеля (ножниц), помещают в
фарфоровую ступку и растирают фарфоровым пестиком до однородного мелкодисперсного, гомогенного
состояния. С целью получения лабораторной пробы для выделения ДНК при помощи одноразового шпате
ля отбирают от гомогенной средней пробы 100 — 150 мкл материала по насыпному объему, который поме
щают водноразовую микропробирку вместимостью 1.5 см3, маркируют и используют для выделения ДНК.
5.3.4 Микролробирки слабораторными пробами маркируют номером, нанесенным на пробирки (кон
тейнеры) со средними пробами. После получения лабораторных проб пробирки (контейнеры)с оставшими
ся средними пробами помещают на хранение в течение 1 мес в условиях, указанных производителем
исследуемого материала.
6 Выделение ДНК
Сущность методики заключается в том. что вся ДНК. полученная в результате клеточного лизиса,
связывается ссорбентом и в таком состоянии проходитстадии очистки, а затем при помощи элюции пере
водится в раствор.
6.1 Подготовка набора реагентов для выделения ДНК
6.1.1 Содержимое флаконов с ОБ 1и ОБ 2 переносят в мерные цилицары и доводят объем до 50 см3
этиловым спиртом (95 %-ный, ректификат). Затем переливают вте же флаконы и перемешивают, перевора
чивая плотно закрытые флаконы 5-6 раз.
6.1.2 Хранят рабочие растворы ОБ 1 и ОБ 2 в плотно закрытых флаконах при температуре 4 =С в
течение 1года.
6
224