ГОСТ Р 52723— 2007
Приложение А
(обязательное)
Меры предосторожности при работе в ПЦР-лаборатории
Для исключения ложноположительных результатов исследования и неправильной интерпретации полу
ченных данных, а также чтобы предотвратить неконтролируемое распространение амплифицированных фраг
ментов. при работе в лаборатории необходимо соблюдать следующие требования:
А.1 ПЦР-лаборатория должна включать следующий набор рабочих зон:
- зона приема и регистрации.
- зона первичной обработки материала:
- зона выделения ДНК;
- зона проведения ПЦР:
- зона детекции продуктов амплификации (отсутствует в случае, если детекция продуктов ПЦР осуществля
ется по методике ПЦР в реальном времени).
А.1.1 Зона приема и регистрации предназначена для регистрации и хранения поступающего материала.
А.1.2 Зона первичной обработки материала предназначена для сортировки и маркировки образцов, обра
ботки лизирующим буфером, а также первичной инактивации остатков биоматериала.
А.1.3 Зона выделения ДНК предназначена для экстракции ДНК из исследуемого материала, прошедшего
первичную обработку в зоне приема и первичной обработки образцов, а также временного хранения проб выде
ленной ДНК.
А.1.4 Зона проведения ПЦР предназначена для внесения ДНК в реакционную смесь для ПЦР и проведения
амплификации. В этой зоне запрещается проводить все другие виды работ с образцами ДНК. растительным
материалом, микробиологические и другие виды исследований.
А.1.5 Зона детекции продуктов амплификации предназначена для анализа продуктов ПЦР методом элект
рофореза. Зона детекции должна быть изолирована в отдельном помещении с тамбуром для смены рабочей
одежды и УФ-боксом для проведения электрофореза.
А.2 В ПЦР-лаборатории должны быть предусмотрены вспомогательные помещения (гардероб, кабинет
заведующего лабораторией, комната приема пищи, подсобные (складские) помещения, туалет]. Вспомогатель
ные помещения могут быть общими с другими подразделениями учреждения.
А.З Планировочные решения и размещение оборудования должны обеспечивать поточность движения
исследуемого материала. Следует полностью исключить воздухообмен между зоной детекции продуктов ампли
фикации и другими зонами.
А.4 Лаборатория должна быть оборудована водопроводом, канализацией, электричеством, отоплением и
приточно-вытяжной или вытяжной вентиляцией. Все помещения лаборатории обеспечиваются достаточным ес
тественным и искусственным освещением. При необходимости в ПЦР-лаборатории могут быть установлены кон
диционеры.
А.5 Поверхности стен, пола и потолка в лабораторных помещениях должны быть гладкими, без щелей,
легко обрабатываемыми, устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих средств. Полы не должны быть
скользкими. Лабораторная мебель должна иметь покрытие, устойчивое к действию моющих и дезинфицирующих
средств. Поверхность столов не должна иметь трещин и швов.
А.6 Помещения на всех этапах ПЦР-анализа должны быть оборудованы бактерицидными лампами в соот
ветствии с действующими нормативными документами.
А.7 Помещения лаборатории должны быть непроницаемы для грызунов и насекомых.
А.8 ПЦР-лабораторию обеспечивают средствами пожаротушения.
А.9 Каждую зону ПЦР-лаборатории оснащают индивидуальным набором соответствующего лабораторного
оборудования, расходных материалов и рабочей одежды, используемых только в данной зоне. Комплект лабора
торного оборудования определяют с учетом используемых методик проведения ПЦР-анализа. наборов реаген тов
для выделения нуклеиновых кислот, амплификации и детекции результатов исследований.
А.9.1 Приборы, оборудование и средства измерения, используемые в ПЦР-лаборатории, должны быть
технически исправны, иметь технический паспорт и рабочую инструкцию по эксплуатации. Средства измерения
регулярно подвергают метрологическому контролю. Используемые приборы должны соответствовать нормам
безопасности и электромагнитной совместимости.
А.9.2 Для проведения исследования используют приборы и расходные материалы (микропробирки, нако
нечники к автоматическим дозаторам), исключающие возможность перекрестной контаминации (загрязнения
выявляемой ДНК) исходного материала, экстрактов ДНК. Для этого используют:
- термостаты с твердотельным термоблоком;
- пробирки с плотно закрывающимися крышками;
231
13