ГО СТ Р 5W55—96
5.47.2 Испытание на пирогенность методом реакции связывания
комплемента
5.4.7.2.I Приготовление раствора антител
Берут длинным анатомическим пинцетом замороженную гранулу
антител из сосуда Дьюара и помещают в пробирку.
5.4.72.2 Приготовление раствора антигена концентрацией 5 ми
нимальных пирогенных доз в миллилитрах
Вскрывают ампулу с липополисахаридом, содержащую 500 мини
мальных пирогенных доз в
1
мл.
0,1
мл этого препарата переливают
в пробирку с 0,9 мл апирогенного раствора хлорида натрия Приго
товленный раствор тщательно перемешивают, при этом концентра
ция антигена в нем составляет 50 минимальных пирогенных доз в
I мл. Берут 0,1 мл этого раствора и переливают в пробирку с 0,9 мл
апирогенного раствора хлорида натрия. После этого концентрация
антигена будет составлять 5 минимальных пирогенных доз в I мл.
5.4.7.2.3 Приготовление раствора комплемента
Берут длинным анатомическим пинцетом гранулу замороженного
комплемента и помещают в пробирку.
5.4.7.2.4 Приготовление опытного образца
В пробирку с притертой пробкой наливают 1 мл испытуемого
образца вытяжки, антитела и комплемент согласно паспорту. Содер
жимое пробирки перемешивают встряхиванием.
5.4.7.2 5 Приготовление контрольного образца с отрицательной
реакцией
В пробирку
€
притертой пробкой наливают I мл раствора хлорида
натрия, антитела и комплемент согласно паспорту. Содержимое про
бирки перемешивают встряхиванием.
5.47.2.6 Приготовление контрольного образца с положительной
реакцией
В пробирку с притертой пробкой наливают 0,1 мл раствора анти
гена по 5.4.7.2.2 и добавляют антитела и комплемент согласно пас
порту. Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием.
5А7.2.7 Опытный и контрольные образцы помещают в термо
стат. Проводят инкубацию в течение 18 — 24 ч при температуре
(27 ± 2) *С в термостате или при температуре (5 ± 2 ) ’ С в холодиль
нике. Рекомендуемый температурный режим — всоответствии с ука
занным в паспорте.
5.4.7.2
8
Приготовление биосенсоркой системы
В пробирки отмеряют пипеткой объем разбавителя, указанный в
паспорте, ставят их в водяную баню при температуре (40+1,5) ’С. В
каждую пробирку добавляют объем антител, указанный в паспорте.
29