ГОСТ Р 50855-%
ЕЕ
5.4.4.4 Приготовление проб (контрольной и с 100%-ным гемолизом)
5.44.4.1 а) Контрольная проба - 0,5 мл 10% ной взвеси эритро
цитов и 5 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия — для контейнс-
ю» «Компопласт*.
б) Контрольная проба — 0,5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов и
5 мл раствора «Глюгицир* (в стекле), используемого в качестве кон
трольного образца данной испытуемой партии, — для
контейнеров «Гемакон*.
5.4.4.4.2Проба с 100%-ным гемолизом: 0,5 мл 10%-ной взвеси
эритроцитов и 5 мл дистиллированной воды — происходит полное
разрушение эритроцитов, что соответствует
100
%-ному гемолизу.
Контрольную пробу и пробу с 100%-ным гемолизом готовят для
каждого образца эритроцктиой взвеси.
5.4.4.5 Проведение определения
В три пробирки помешают по 0,5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов
К 0,5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов в каждую пробирку прибавля
ют по
5
мл вытяжки, в которую предварительно добавлен хлористый
натрий. Смесь ставят в термостат на 1ч при температуре (37 ± 2) *С.
затем центрифугируют в течение
20
мин при
2000
об/мин.
Все манипуляции по отношению к контрольной пробе и пробе с
100
%-ным гемолизом проводят параллельно с опытными пробами,
как описано выше. Надосадочную жидкость отделяют для проведе
ния измерений оптической плотности.
5.4.4.6 Оптические измерения
Оптическую плотность опытной, контрольной пробы и пробы с
100
%-ным гемолизом измеряют на фотоэлсктроколориметре при
длине волны 540 нм против «холостой* пробы (вода). Толщина кю
веты
1
см.
Результаты регистрируют по отттической плотности.
5.4.4.7 Расчет процента гемолиза проводят по формуле
Процент гемолиза =*—
оп ~
-
к
к 100 *
К,
.
где
Еоп —
оптическая плотность опытной пробы;
Ех —
оптическая плотность контрольной пробы;
£|00
— ошичсская плотность воды со взвесью эритроцитов —
100
%-ный гемолиз;
К
— поправочный коэффициент, учитывающий дополнитель
ное разбавление дистиллированной водой при условии,
что £юо >
10
.
П р и м е ч а н и е — Если оптическая плотность контрольной пробы (10%-ная
21