ГО СТ Р 50855-96
48 ч после введения внугрикожной пробы животных забивают дска-
литацией, отбирая кровь дляпроведения специфических им
мунологических реакций Используют иммунологические тесты,
основанные на определении образования комплекса антиген-анти
тело: реакцию дегрануляции тучных клеток (РДТК), реакцию пассив
ной гемагглютинации (РПГА), реакцию связывания комплемента
(РСК), реакцию специфической агломерации лейкоцитов (РСАЛ),
реакцию специфического лизиса лейкоцитов (РССЛ). До начала про
ведения иммунологических специфических реакций необходимо
тщательно подобрать рабочую концентрацию вытяжки, не вызываю
щуюденатурации сывороточных белков и нс оказывающую цитоток
сического действия.
У забитых животных определяют коэффициенты массы иммуно-
компетентных органов — селезенки и тимуса и обрабатывают полу
ченный материал статистически с определением коэффициента .t*
Стьюдента.
При оценке сенсибилизирующего эффекта учитывают результаты
внугрикожной пробы, определения коэффициентов массы внутрен
них органов и иммунологических тестов с кровью животных.
5.4.4
Определение гемолитической активности
5.4.4
.1
Принцип метода — определение гемолитического дейст
вия вытяжки по
100
%-ному гемолизу.
5.4.4.2 Вытяжки готовятся в соответствии с 4.1.
5.4.4.3 Приготовление 10%-ной взвеси эритроцитов
Для приготовления взвеси эритроцитов может быть использована
эритроцитная масса или цитратная кровь, заготовленная на
3
,
9
%-ном
растворе цитрата натрия в соотношении 1:9. Срок хранения цитрат-
ной крови (эритроцитаой массы) 72 ч при температуре от 4 до
6
*С.
;>крови <эРитроцитной массы) центрифугируют 10 мин при
2000
об/мин. Надоеадочную жидкость сливают, к осадку добавляют
8
мл стерильного 0,9%-ного раствора хлористого натрия. Содержи
мое взбалтывают и центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин. Надо-
садочную жидкость сливают. Эту операцию (отмывание клеток)
повторяют два раза. После отмывания надосадочная жидкость долж-
на быть прозрачна, бесцветна и не иметь следов гемолиза.
Если надосадочная жидкость не отвечает указанным требованиям,
эритроциты не могут быть использованы для приготовления взвеси.
Для получения 10%-ной взвеси эритроцитов I мл осадка клеток
смешивают с 9 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия. Получен
ную взвесь эритроцитов допускается хранить не более 24 ч при тем
пературе от 4 до
6
*С в холодильнике.
20