ГОСТ Р 51758-2001
1
1
Сущность метода заключается в выращивании бактериальной культуры в испытуемой пита
тельной среде, приготовлении разведенных суспензий полученной исходной культуры, высеве раз
веденных суспензий на МПА и подсчете количества КОЕ в 1см* исходной культуры.
4.1.1.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104. наибольшим пределом взвешивания
I кг, 3-го класса точности.
Анализатор жидкости потенциометрический по ГОСТ 27987. диапазоном измерения pH от 4
до
8
и погрешностью измерения ±
0
, .
pH-электрод стеклянный типа ЭСЛ-41 Г.
Термометр ртутный стеклянный по ГОСТ 28498, диапазоном измерения от 0 до 100 *С и
погрешностью измерения ±0,5 ’С.
Часы наручные механические по ГОСТ 10733, 4-ой группы, 2-го класса, средним суточным
ходом от минус 20 до плюс 55 с/сут.
Пипетки по ГОСТ 29227, вместимостью 0,5; 1; 2; 10 и 25 см3, 2-го класса точности.
Цилиндры по ГОСТ 1770, вместимостью 25. 100, 500 и 1000 см3.
Термостат, обеспечивающий температуру нагрева (37,0±0.5) ’С.
Баня водяная.
Автоклав.
Чашки Петри по ГОСТ 25336. стерильные.
Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.
Шпатель стеклянный или палочка с резиновым наконечником.
Петля платиновая.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026. средней фильтрации, марки II.
Вода мясная по ГОСТ 20729.
Бульон мясопептонный по ГОСТ 20730.
Агар мясопептонный по ГОСТ 29112.
Пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805.
Натрий хлористый по ГОСТ4233 кристаллический и растворизотонический массовой дали 0.85 %.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328; раствор массовой дали 10 %.
Кислота соляная по ГОСТ 3118: раствор массовой доли 10 %.
Культуры тест-штаммов аэробных микроорганизмов:
Staphylococcus aureus (S.aureus) штамм Лоссманов; Shigella flexneri (S.flexneri) штамм la 8516;
Escherichia coli (E.coli) штамм 675;
Corynebacterium xerosis (C.xerosis) штамм 1911 и Enterococcus faecalis (E.faecalis) штамм 6783 —
или другие виды микроорганизмов, показательные для испытуемой среды.
Допускается применять другие средства измерения с метрологическими характеристиками и
оборудование с техническими характеристиками не хуже, а также реактивы и среды по качеству не
ниже указанных.
4.1.1.2 Подготовка к испытанию
4. .1.2.1 Приготовление питательных сред
Испытание гидролизатов
В гидролизатах определяют массовые доли аминного азота и пептидов по ГОСТ 29311, после
чего готовят раствор гидролизата вдеминерализованной воде (бульон) массовыми далями аминного
азота от 0,15 до 0.18 % и пептидов не менее 1.5 %. Недостаток пептидов компенсируют
добавлением сухого ферментативного пептона. В приготовленный бульон добавляют
хлористый натрий из
расчета 0,5 г на 100 см
3
бульона.
Устанавливают pH среды по потенциометрическому анализатору в диапазоне 7,4—7.6, добавляя
растворы гидроокиси натрия или соляной кислоты, и кипятят в течение 5 — 7 мин. Среду охлаждают
и проверяют pH. Если требуется, pH корректируют, после каждой коррекции нагревая среду до
кипения. После охлаждения среды pH должен быть от 7,4 до 7.6.
Среду фильтруют, разливают в пробирки по
6
—
8
см3. Пробирки закрывают ватно-марлевыми
пробками и пергаментными колпачками. Среду стерилизуют в автоклаве при 120 *С в течение
30 мин. После стерилизации pH среды должен быть от 7,2 до 7,6.
Испытание мясной воды
Мясную воду фильтруют. К 100 см
3
фильтрата добавляют 1г сухого ферментативного пептона
по ГОСТ 13805 или другого, используемого в качестве стандартного образца, и 0.5 г хлористого
натрия. Устанаазивают pH среды (МПБ), фильтруют, разливают в пробирки и стерилизуют, как при
испытании гидролизатов.
3