ГОСТ Р 51758-2001
Т абли ца 2 —Расчетное количество клеток
К оли честв клеток и объеме разведенной суспензии
Показатель разведении
0.1 см»0.2 см3
ю 4IOOOO20000
10510002000
10*100200
1071020
4.2.3 Проведение испытания
В пробирки с испытуемой средой пипеткой вносят по 0,1 или 0,2 см’ из трех-четырех разве
денных суспензий бактериальной культуры, начиная с последней. Пробы инкубируют в термостате
при (37,0 ± 0,5) *С втечение 24 ч. Затем в них для разных разведений визуально определяют наличие
роста микроорганизмов (в жидких средах —в виде их помутнения, образования осадка, пленки, газа или
других проявлений; на плотных средах —по формированию колоний).
4.2.4 Обработка результатов
За чувствительность питательной среды принимают показатель максимального разведения куль туры.
дающего рост микроорганизма в испытуемой среде, или соответствующее ему количество мик
робных клеток, которое определяют по таблице
2
для внесенного объема бактериальной культуры.
4.3Метод определения эффективности азотной питательной среды для роста микроорганизмов
Метод заключается в получении концентрированной микробной суспензии, содержащей оп
ределенное количество микробных клеток, приготовлении из нее разведенных суспензий, высеве на
испытуемую плотную среду точных объемов разведенных суспензий, подсчете количеств выросших
колоний и сравнении их с количествами высеянных клеток.
4.3.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Аппаратура, материалы и реактивы —по 4.2.1.
4.3.2 Подготовка к испытанию
Подготовка культуры исходной суспензии тест-штамма и ее разведений с расчетным количе
ством клеток —по 4.2.2.
4.3.3 Проведение испытания
В 10 чашек Петри с испытуемой питательной средой пипетками вносят по 0.1 или 0.2 см’ двух
разведенных суспензий с расчетным количеством клеток
100
(или
200
) и
10
(или
20
), начиная с
последней, по 5 чашек на каждое разведение. Суспензии равномерно распределяют по всей чашке,
дают жидкости впитаться, после чего чашки переворачивают вверх дном и ставят в термостат
температурой (37,0 ± 0.5) ’С на 20 —24ч.
Подсчитывают количество колоний, выросших на чашках Петри с испытуемой средой из
внесенного объема каждой разведенной суспензии.
4.3.4 Обработка результатов
Определяют среднее арифметическое подсчитанного количества колоний в каждом разведении
(для пяти чашек), сравнивают его с расчетным количеством (таблица
2
) и выражают в процентах.
За результат испытаний эффективности среды принимают среднееарифметическое результатов
вычислений для обоих разведений, выраженное в процентах.
4.4 Методы определения влияния питательной среды на типичность микроорганизмов
Влияние питательной среды на типичность тест-штаммов микроорганизмов определяют срав
нением со свойствами, приведенными в таблице 3.
Т абли ц а 3 —Морфологические и культурально-биохимические свойства тест-штаммов
Характеристика iccr-штамма микроорганизмов
Свойство
тест-штамма
E.coli
S.flexncriS.aurcuxЕ.Гаеса1иС.кепий
Форма и раз
мер клеток
Наточки длиной
0,3 - 0,4 мкм
Наточки длиной
0.3 —0,4 мкм
Кокки диамет
ром 0.5 — 1 мкм
Овондные. слег
кавытянутые
кокки диаметром
0.5 — 1 мкм
Короткие палоч
ки. иногда була
вовидной формы
размерами
(0.3 - 0,8
х
1 .5 -
—8.0) мкм
7