ГОСТ Р 51758-2001
1
1
0
Го оси ординат откладывают соответствующие этим процентам степени ингибирования /Л, %. Го
графику определяют объемную долю токсина, соответствующую 50 %-ной степени ингибирования
роста E.coli, и принимают ее за единицу ингибирования (IU30).
5.2.4.3Индекс ингибирования для исходного неразведеиного фильтрата Х2, IU
5
, вычисляют
по формуле
*2
ИХ)
с ?
(
3
)
где С —объемная доля токсина, соответствующая 50 %-ной степени ингибирования роста E.coli, %:
100
—объемная доля токсина в неразделенном фильтрате, %.
6Методы определения ростовых свойств питательных сред
для культур клеток
1
6.1 Метод определения ростовых свойств питательных сред для первичных культур клеток
Сущность метода состоит в приготовлении концентрированной суспензии первичной культуры
клеток фибробластоп перепелиных или куриных эмбрионов, посеве приготовленных суспензий на
испытуемую и контрольную среды, микроскопическом определении процента роста монослоя,
расчете ростовых свойств среды в баллах и классификации среды.
6
.
1.1
Аппаратура, материалы и реактивы
Анализатор жидкости потенциометрический по ГОСТ 27987, диапазоном измерения pH от 4
до
8
и погрешностью измерения ±
0
, .
pH-электрод стеклянный типа ЭСЛ-41 Г.
Кондуктометр, позволяющий проводить измерения от 0 до 5 мкСим с погрешностью
±0,1 мкСим.
Термометр ртутный стеклянный по ГОСТ 28498, диапазоном измерения от 0 до 100 *С и
погрешностью измерения ±0.5 *С.
Часы наручные механические по ГОСТ 10733, 4-Й группы, 2-го класса, средним суточным
ходом от минус 20 до плюс 55 с/сут.
Пипетки по ГОСТ 29227, вместимостью 0,5; I; 2; 10 и 25 см5, 2-го класса точности.
Цилиндры по ГОСТ 1770. вместимостью 25, 100, 500 и 1000 см5.
Термостат, обеспечивающий температуру нагрева (37,0 ± 0.5) “С.
Микроскоп световой биологический по ГОСТ 8074, обеспечивающий увеличение 7О4.
Центрифуга частотой вращения от 1000 до 3000 мин-1.
Камера Горяева рабочим объемом 0.9 мм3.
Ножницы глазные.
Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.
Сосуды культуральные рабочей площадью 40 см5.
Стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284.
Флаконы вместимостью 500 см5.
Чашки Петри по ГОСТ 25336.
Калий йодистый по ГОСТ 4232. раствор массовой доли 2 % в этиловом спирте.
Масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300.
Сыворотка крови крупного рогатого скота, предварительно тестированная (референс-сыворот-
ка). нативная без консерванта.
Раствор Хенкса сбалансированный солевой.
Трипсин, раствор массовой доли 0,25 %.
Синь трипановая. раствор массовой доли 0,1 %.
Кристалл-внолета. раствор массовой доли 0,1 %.
Динатрненая соль этнлендиаминотетрауксусной кислоты (трилон Б, версен) по ГОСТ 10652,
раствор массовой доли
0.02
%.
Натрий углекислый кислый по ГОСТ 4201. раствор массовой доли 7.5 %, для культур клеток.
Яйца с эмбрионами куриные или перепелиные.
Среды питательные гидролизные — образцы сухие стандартные ССО-ФГМС и ССО-ГЛА.
6.1.2 Подготовка к испытанию
6
.1.2.1 Приготовление тест-культуры тканей
Перепелиные или куриные яйца из хозяйств, благополучных по инфекционным заболеваниям.