ГОСТ Р 56833—2015
раствора доводят бидистиллированной водой до метки.
Срок хранения раствора при температуре от 4 °С до 6 “С — не более 7 сут.
В.4.2 Подготовка градуировочных растворов
Для построения градуировочного графика готовят серию градуировочных растворов в количестве не менее
пяти путем разбавления стандартного раствора углевода по 4.1.
В четыре мерные колбы вместимостью 100 см5 помещают 50 см3. 25 см5. 15 см5. 10 см3 стандартного
раствора углевода (4.1). Объем растворов доводят бидистиллированной водой до метки.
В.4.2.1 Все растворы готовят перед определением.
В.4.3 Подготовка подвижной фазы
Дегазацию растворенного в подвижной фазе воздуха проводят с помощью водоструйного или вакуумного
насоса, обрабатывая бидистиллированную воду ультразвуком в течение 30 с при комнатной температуре. По
возможности, избегают вспенивания воды.
Подвижную фазу готовят вдень определения.
В.4.4 Подготовка анализируемой пробы продукта
В.4.4.1 (1,000 ± 0.001) г сухого продукта помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3- Мерным
цилиндром приливают 20 см3 бидистиллированной воды и перемешивают. Обьем раствора доводят
бидистиллированной водой до метки и снова тщательно перемешивают. Затем центрифугируют 10 мин со
скоростью 15 об/мин в течение 5 мин ифильтруют через нейлоновый фильтр.
В.4.4.2 (10.000 ± 0.001) г сгущенного продукта помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3- Мерным
цилиндром приливают 20 см3 бидистиллированной воды и перемешивают. Обьем раствора доводят
бидистиллированной водой до метки и снова тщательно перемешивают. Затем центрифугируют 10 мин со
скоростью 15об/мин в течение 5 мин и фильтруют через нейлоновый фильтр.
В.4.4.3 Жидкую сывороткупомещают в центрифужные пробирки соответствующего объема и
центрифугируют 10 мин со скоростью 15об/мин в течение 5 мин. Затем фильтруют через нейлоновый фильтр.
В.4.4.4 Для анализа используют водную фракцию
В.4.5 Подготовка хроматографа
Установку, включение и подготовку хроматографа к работе выполняют в соответствии с руководством по
эксплуатации прибора.
В.4.5.1 Условия хроматографирования:
- скорость потока — (0.3 - 0.6) см’/мин;
- температура — 85.0 °С;
- подвижная фаза: бидистиллированная вода:
- детектор: рефрактометрический.
В.4.5.2 Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика измеряют площади пиков, соответствующие массовым долям
углевода в градуировочных растворах. Каждый градуировочный раствор хроматографируют не менее трех раз.
Измерения выполняют последовательно, начиная с растворов с наименьшей массовой концентрацией
определяемого вещества.
Полученные при хроматографировании значения не должны отклоняться от стандартных не более, чем на
5.00%.
По полученным данным, используя программные обеспечения к приборам, рассчитывают коэффициенты
регрессии а и б прямой У =а -XW +Ь.
Градуировочный график строят с учетом вычисленных значений уравнения:
У = а •Х
г
р
* Ь.(1)
гдеУ — площадь пика углевода;
а и Ь— коэффициенты регрессии;
Х,,р— массовая доля углевода в градуировочном растворе. %.
В.4.5.3 Градуировку проводят не реже 1 раза в квартал, а также при использовании новой партии
реактивов, замене колонок или ремонте хроматографа.
В.5 Условия проведения измерений
При выполнении измерений влаборатории должны соблюдаться следующие условия:
температура окружающего воздуха..........................(20 ^ 5) "С;
относительная влажность воздуха ..........................(55 ± 25) %;
атмосферное давление.............................................(96 ±10) кЛа;
частота переменного тока........................................(50 ± 5) Гц:
напряжение всети...................................................(220 ± 10) В.
Для проведения измерений применяют бидистиллированную воду, которую готовят следующим образом:
дистиллированную воду фильтруют через мембранный фильтр (размер диаметра пор не более 0.5 мкм). затем
кипятят для удаления растворенного воздуха и охлаждают до комнатной температуры.
В.6 Проведение измерений
В.6.1 Дегазация анализируемой пробы
В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают 3 см1 фильтрата по 4.4. Дегазацию растворенного в
фильтрате воздуха проводят с помощью вакуумного насоса, обрабатывая ультразвуком в течение 30 с при
комнатной температуре. По возможности, избегают вспенивания.
18